文献类型： 中文期刊

作者： 周金陈 ¹ ; 肖鹏 ¹ ; 李孟琪 ¹ ; 张博 ¹ ; 郑海英 ² ; 杨春艳 ² ; 田新如 ¹ ; 黄依林 ¹ ; 杨小淦 ¹ ; 尚江华 ² ;

作者机构： 1.广西大学动物科学技术学院

2.广西水牛研究所/广西水牛遗传繁育重点实验室

关键词： 水牛乳腺上皮细胞;相思子碱;脂多糖;β-酪蛋白;P53/mTOR通路

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2024 年 55 卷 007 期

页码： 1887-1896

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探究相思子碱（Abrine）通过调节P53/mTOR通路缓解脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）对水牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响，为缓解乳房炎引起的水牛乳品质下降提供理论依据。【方法】使用脂多糖构建水牛乳腺上皮细胞炎症模型，同时使用相思子碱、P53抑制剂（Pifithrin-μ）、P53激活剂（Kevetrin hydrochloride）与水牛乳腺上皮细胞共同孵育12 h；通过HE染色观察水牛乳腺组织形态，采用CCK-8法检测细胞活性，使用ELISA试剂盒检测水牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白分泌水平，利用实时荧光定量PCR测定NF-κB、IL-1β、TNFα、β-casein、m TOR、P53、JAK2、STAT5和AKT1基因相对表达量，并以Western blotting检测NF-κB、IL-1β、TNFα、β-casein、mTOR和P53蛋白相对表达量。【结果】临床型乳房炎乳腺组织间隙及腺泡腔被大量中性粒细胞浸润，部分腺泡结构呈现一定程度的萎缩。经1.0μg/mL脂多糖处理，水牛乳腺上皮细胞活力显著降低（P<0.05，下同），2.0、4.0和8.0μg/mL脂多糖处理，水牛乳腺上皮细胞活力极显著降低（P<0.001）,25、50、100和200μmol/L相思子碱处理能缓解脂多糖的影响，水牛乳腺上皮细胞活力明显升高。与空白对照组相比，脂多糖处理组水牛乳腺上皮细胞NF-κB、IL-1β、TNFα和P53基因和蛋白相对表达量显著升高，β-酪蛋白表达水平显著降低；与脂多糖组相比，相思子碱+脂多糖处理组水牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白水平显著升高，NF-κB、IL-1β、TNFα、P53基因和蛋白相对表达量显著降低；与脂多糖组相比，脂多糖+Pifithrin-μ组水牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白表达水平显著升高，与相思子碱组相比，相思子碱+Kevetrin hydrochloride组水牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白表达水平显著降低。【结论】脂多糖降低了水牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白合成水平与β-酪蛋白合成相关基因及其编码蛋白的表达水平；相思子碱能通过抑制NF-κB通路缓解脂多糖诱导的水牛乳腺上皮细胞炎症，并通过调节P53/mTOR通路缓解脂多糖诱导的水牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白合成减少。