文献类型： 中文期刊

作者： 甘靖凡 ¹ ; 黄嘉馨 ¹ ; 吉艳红 ¹ ; 王丹 ¹ ; 张博 ¹ ; 朱启运 ¹ ; 亓文宝 ² ; 徐帅 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院/动物疫病防控全国重点实验室

2.华南农业大学兽医学院/动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 鸡白细胞介素18;纳米抗体;噬菌体展示技术;特性鉴定

期刊名称： 中国农业大学学报

ISSN： 1007-4333

年卷期： 2025 年 30 卷 011 期

页码： 126-135

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备特异性识别鸡白细胞介素18(Chicken Interleukin-18, chIL-18)的纳米抗体，本研究构建了chIL-18蛋白表达重组质粒并制备出chIL-18蛋白，利用chIL-18蛋白免疫羊驼，扩增羊驼外周血淋巴细胞的抗体基因重链可变区，构建chIL-18 Nb噬菌体展示文库。以chIL-18蛋白为靶标抗原对文库进行富集淘选，克隆与chIL-18蛋白反应阳性的重组噬菌体Nb序列，并将其构建到载体上进行Nb表达。对chIL-18 Nb进行生物学活性检测后将生物学活性最优的chIL-18 Nb进行初步应用评价。结果表明：1）本研究成功构建了库容量为6×10～8 PFU/mL的chIL-18 Nb噬菌体展示文库；2）获得5株具有良好反应活性、特异性和结合活性的chIL-18 Nb，其中Nb1生物学活性最佳，满足Western blot和IFA等试验抗体应用要求。综上，该研究首次获得与chIL-18蛋白特异性反应的Nb，为后续chIL-18定量检测方法的建立及生物学功能的研究提供材料支持。