文献类型： 中文期刊

作者： 刘思国 ¹ ; 康丽娟 ² ; 江国托 ² ; 刘明春 ² ; 孔宪刚 ² ; 杨宏伟 ² ; 刘忠贵 ² ; 李从寿 ² ; 宋春青 ² ; 霍兰享 ² ; 卢景良 ² ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,大连市畜牧兽医技术服务中心,大连三仪生物工程研究所,沈阳农业大学畜牧兽医学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,吉林省畜禽总公司,东北农业大学动物医学院,四川省西南民族学院,天津市西青区王稳庄镇兽医站,天津市西青区南河镇畜牧兽医站,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 黑龙江哈尔滨150001,黑龙江哈尔滨150001,黑龙江哈尔滨150001

关键词： 鸡传染性支气管炎病毒;RT-PCR;检测

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2002 年 24 卷 05 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法。通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明 ,两次PCR产物的大小为 0 .7kb和 0 .5kb ,与实际设计相符。而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性。用IBVHB(华北 )株感染SPF鸡后 ,应用我们所建立的PCR方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的IBV ,在SPF鸡感染IBV后的 2 1天仍然能够检测到IBV的基因组 ,Southernblot杂交试验证明了我们获得的PCR产物为IBV的核蛋白基因。对 30份自然感染病料的检测表明 ,本实验所建立的PCR方法检测阳性数为 15份 ,阳性率为 5 0 % (15 /30 ) ;鸡胚接种检测的阳性数为 17份 ,阳性率为 5 6 .7% (17/30 ) ;IFA检测的阳性数为 11份 ,阳性率为 36 .7% (11/30 )。PVR检测法与鸡胚接种方法的阳性符合率为 93.3% (14/15 ) ,统计学分析表明 ,P >0 .0 5 ,差异不显著 ,而PCR检测法与IFA的阳性符合率为 6 0 % (9/15 )。结果证明本实验所建立的PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点 ,适用于不同来源及不同血清型IBV的检测