文献类型： 中文期刊
作者： 吴柏增 1 ; 何琪 1 ; 姚方杰 1 ; 赵梦然 1 ;
作者机构： 1.吉林农业大学园艺学院;中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业农村部农业微生物资源收集与保藏重点实验室;吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心
关键词： 糙皮侧耳;乳酸脱氢酶;高温响应;基因表达
期刊名称： 生物技术通报
ISSN： 1002-5464
年卷期： 2023 年 39 卷 011 期
页码： 350-359
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)可催化丙酮酸与乳酸(lactic acid,LA)之间的可逆转化,为探索乳酸脱氢酶基因在糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌丝体高温胁迫响应中的作用,在糙皮侧耳(P.ostreatus)菌株CCMSSC00389 基因组中鉴定获得了 8 个乳酸脱氢酶编码基因.生物信息学分析结果显示,3 个基因编码D型乳酸脱氢酶,5 个基因编码L型乳酸脱氢酶.氨基酸序列比对、系统发育、三维结构和亚细胞定位分析显示,3 个D型乳酸脱氢酶的同源性较高,可能属于细胞色素C依赖的D型乳酸脱氢酶,D-LDH2 和D-LDH3 位于线粒体中;5 个L型乳酸脱氢酶的氨基酸序列同源性较低,并按电子受体和亚细胞定位的不同分为 3 个类型.通过检测 36℃、40℃高温胁迫下乳酸脱氢酶基因的表达量变化,明确D-ldh3、L-ldh5和L-ldh7表达特征相同,L-ldh6 和L-ldh8 的表达特征相同,D-ldh1、D-ldh2 和L-ldh4 则表现出不同的基因表达趋势,表明乳酸脱氢酶基因对不同高温胁迫温度的响应方式存在差异.高温胁迫条件下,乳酸脱氢酶总酶活性降低,胞内乳酸含量升高;外源添加乳酸脱氢酶抑制剂和乳酸都能显著抑制菌丝生长,表明乳酸脱氢酶能够调控热胁迫下糙皮侧耳的菌丝生长.推测糙皮侧耳乳酸脱氢酶通过降低基因转录水平和酶活性,影响了胞内乳酸脱氢向丙酮酸的转化,导致胞内乳酸的过量积累造成细胞损伤,最终抑制了菌丝生长速率.
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