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基于高压辅助处理的青稞籽粒电镜观测超微结构样品制备

文献类型： 中文期刊

作者： 王盈 1 ; 刘丽娅 1 ; 朱捷 1 ; 马慧 1 ; 何珊 1 ; 孙艳丽 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院农产品加工研究所/农业农村部农产品加工综合性重点实验室

关键词： 青稞籽粒;透射电子显微镜;样品制备;高压处理;超微结构

期刊名称： 食品科学技术学报

ISSN： 2095-6002

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 147-158

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 透射电镜生物样品制备过程中,因青稞籽粒结构致密、细胞壁厚、试剂渗透性差,使用常规样品制备方法会造成制样失败,无法对籽粒超微结构进行观察.为解决青稞籽粒制样问题,将高压处理引入戊二醛固定和树脂浸透两个步骤中,并对常规样品制备方法中戊二醛固定液、锇酸固定液、树脂浸透液浓度进行相应调整.通过对不同试剂浓度和不同压强处理的结果进行观察和比较,选定实验范围,通过正交试验确定优化实验条件.结果表明,青稞籽粒透射电镜样品制备的较优前处理条件:体积分数为4.5%的戊二醛,质量浓度为15 g/L的锇酸,过夜处理的树脂浸透液中丙酮与环氧树脂体积比为1∶1,戊二醛固定和树脂浸透的高压处理压强为50 MPa,处理时间为10 min.在该处理条件下制备的青稞籽粒观测样品表皮细胞壁完整、无断裂,糊粉层各组织完整、结构清晰、无空洞,胚乳层细胞结构完整、形状规则,淀粉粒无缺失和褶皱.将该样品用于实验,结果稳定、可重复,可用于青稞籽粒透射电镜样品制备.

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