文献类型： 中文期刊

作者： 章力 ¹ ; 魏凯 ¹ ; 李珊珊 ¹ ; 宁宇 ¹ ; 路菲菲 ¹ ; 王孝宣 ¹ ; 国艳梅 ¹ ; 刘磊 ¹ ; 李鑫 ¹ ; 杜永臣 ¹ ; 李君明 ¹ ; 黄泽军 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院蔬菜花卉研究所/蔬菜生物育种全国重点实验室

关键词： 番茄;种子;红色荧光蛋白;油体蛋白;转基因鉴定

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 1-8

摘要： 转基因技术有助于番茄基因功能研究和遗传改良，其中转基因后代的筛选是一个非常重要但工作量大的环节。本研究基于番茄油体蛋白基因家族序列分析和番茄基因表达数据库SGN-TEA搜索结果，克隆了一个种子特异且高水平表达的油体蛋白基因SlOLE1（Solyc06g034040）。利用无缝克隆的方法将红色荧光蛋白基因TagRFP的编码区序列插入到SlOLE1基因的终止密码子前，形成一个嵌合基因SlOLE1-TagRFP。将嵌合基因插入到pBI121双元载体，构建植物表达载体pSlOLE1-TagRFP,利用农杆菌介导法转化番茄品种‘Money Maker’,T₀代植株的自交种子在荧光显微镜下呈现出明亮红色荧光或无荧光。PCR分子标记进一步验证发现，红色荧光种子萌发的幼苗均存在TagRFP序列，表明在种子阶段检测红色荧光筛选转基因番茄后代的准确率为100%。由此，本研究建立了一种利用SlOLE1-TagRFP嵌合基因，可以通过种子红色荧光可视化分析，简单快速、低成本地鉴定转基因番茄后代的方法。