科研产出
γ-银环蛇毒素致小鼠呼吸障碍机制
《中国药理学与毒理学杂志 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：目的 探究γ-银环蛇毒素（γ-BGT）致小鼠呼吸障碍作用及其可能机制。方法 (1) 6只雄性昆明小鼠麻醉后行气管插管术，记录呼吸频率，呼吸稳定后iv给予γ-BGT 6 mg·kg-1，出现呼吸频率降低后iv给予尼可刹米12.5 mg·kg-1。采用BL420信号采集与处理系统检测小鼠呼吸频率。(2)雄性昆明小鼠随机分为正常对照组（生理盐水，ip）、γ-BGT组（6 mg·kg-1,ip）、γ-BGT+尼可刹米组（ip给予γ-BGT 6 mg·kg-1，当小鼠出现呼吸浅慢和腹式呼吸加强时，ip给予尼可刹米12.5 mg·kg-1）。ELISA法检测延髓组织中谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量。Western印迹法检测延髓组织中谷氨酸脱羧酶65(GAD65)、GAD67蛋白表达水平。(3)体外培养原代小鼠延髓神经元，并分为细胞对照组、γ-BGT组、氯贝胆碱组、加拉碘铵组、γ-BGT+H-89组、γ-BGT+Y-27632组。γ-BGT组、氯贝胆碱组、加拉碘铵组分别用γ-BGT40 mg·L-1、氯贝胆碱100 mmol·L-1、加拉碘铵100 mmol·L-1孵育4 h,γ-BGT+H-89组、γ-BGT+Y-27632组加入γ-BGT 40 mg·L-1预处理4 h后，分别更换蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89 50 mmol·L-1、Ca2+通道抑制剂Y-27632 50 mmol·L-1继续孵育2 h。ELISA检测原代小鼠延髓神经元内Glu、GABA、环磷酸腺苷（cAMP）含量和钙蛋白酶水平。Western印迹法检测原代小鼠延髓神经元内GAD65、GAD67蛋白表达水平及PKA磷酸化水平。Fluo-4荧光探针检测原代小鼠延髓神经元内Ca2+水平。结果 (1)与正常对照组比较，γ-BGT组小鼠呼吸频率显著降低（P<0.05）,γ-BGT+尼可刹米组呼吸频率显著回升（P<0.05）。(2)与正常对照组比较，γ-BGT组Glu含量显著降低（P<0.05）,GABA含量显著升高（P<0.05）,Glu/GABA比值显著降低；GAD65和GAD67蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。与γ-BGT组比较，γ-BGT+尼可刹米组Glu含量显著升高（P<0.05）、GABA含量显著降低（P<0.05）,Glu/GABA比值显著升高；GAD65和GAD67蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。(3)与细胞对照组比较，γ-BGT组Glu含量显著降低（P<0.05）,GABA含量显著升高（P<0.05）,Glu/GABA比值显著降低；GAD65和GAD67蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;cAMP含量显著升高（P<0.05）,PKA磷酸化水平显著升高（P<0.05）,Ca2+水平和钙蛋白酶活性显著升高（P<0.05）。与γ-BGT组比较，加拉碘铵组Glu,GABA,Glu/GABA比值和GAD表达水平等方面均呈现相似的变化趋势；γ-BGT+Y-27632组钙蛋白酶活性显著降低（P<0.05）,GAD65和GAD67蛋白表达显著降低（P<0.05）;γ-BGT+H-89组Ca2+水平和钙蛋白酶活性显著降低（P<0.05）。结论 γ-BGT中毒可导致小鼠呼吸障碍，其机制与γ-BGT通过拮抗延髓神经元M2毒蕈碱乙酰胆碱受体激活cAMP/PKA信号通路，引起细胞内Ca2+水平升高，使GAD表达增加和活性增强，导致延髓Glu和GABA含量失衡有关。
关键词： γ-银环蛇毒素 延髓 谷氨酸 γ-氨基丁酸 呼吸障碍
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紫花苜蓿MsSAUR33通过ABA信号转导途径负调控叶片衰老
《四川农业大学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究MsSAUR33在植物叶片衰老过程中的功能.[方法]构建紫花苜蓿MsSUR33超表达植物载体,将其超表达于野生型拟南芥与紫花苜蓿中,并测定叶片衰老相关指标.[结果]随着叶片衰老,MsSAUR33下调表达.MsSAUR33超表达拟南芥和紫花苜蓿株系的叶绿素含量均显著高于野生型.进一步研究发现,脱落酸(ABA)处理导致MsSAUR33下调表达,且MsSAUR33能与ABA信号转导途径中的蛋白激酶MsSnRK2.3相互作用.[结论]MsSAUR33通过介导ABA信号转导途径在叶片衰老中发挥负调控作用.
关键词： 紫花苜蓿 MsSAUR33 叶片衰老 脱落酸(ABA)
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碳中和背景下日本绿色食品系统战略:实施路径与镜鉴
《世界农业 》 2025 北大核心
摘要：受全球环境持续恶化、少子老龄化等多因素叠加，日本粮食供给、农业农村发展面临前所未有巨大挑战。基于现实要求，日本农林水产省于2020年提出绿色食品系统战略，以期以绿色生态转型释放农业高质量发展新动能，拉动经济复苏。本文以日本为典型样本，系统分析提出绿色农业食品系统战略的因由、路径选择和典型做法，重点分析中日两国农业绿色可持续发展之间的异同。日本绿色食品系统战略以创新构建可持续生产体系，以生态环保材料减轻环境污染，建设可持续的加工和流通体系，不断强化国民绿色消费和饮食观念，多措并施全面推进农业农村可持续发展。对比中国与日本农业绿色可持续发展间异同，研究发现，中日两国将农业绿色可持续发展上升为国家战略层面予以重视，但中国绿色农业存在明显短板，如区域发展不平衡、创新驱动不足等问题。基于日本典型经验，以及中日两国对比分析，本文指出以科技创新赋能农业绿色可持续发展，打造韧性农业产业链，从理念转变、人才培育、官产学联合等角度提出适应农业高质量发展和绿色转型发展要求的中国式农业支持政策改革的政策建议。
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耕作方式和生物炭用量对冬小麦产量、土壤氮碳的影响
《麦类作物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探讨旋耕和深松条件下生物炭施用量对冬小麦产量和土壤碳氮的影响，探寻冬小麦最佳耕作方式和生物炭施用量组合，2021-2023年通过二因素随机区组试验，设置旋耕和深松两种耕作方式，以及0、4.5和9 t·hm-2三个生物炭施用水平，比较分析了不同处理间冬小麦产量和土壤碳氮的差异。结果表明，耕作方式和生物炭施用量对麦田土壤硝态氮残留量、总碳含量、全氮含量和微生物量碳、氮含量均有显著影响，两者的交互作用对土壤全氮含量和微生物量碳含量的影响分别在2022和2023年均达到显著水平。在0～20 cm土层，与旋耕相比，深松下土壤总碳含量和全氮含量分别提高13.9%和29.5%,同时深松对20～30 cm土层土壤微生物量碳、氮含量均有促进作用，使土壤硝态氮残留量显著降低8.5%。与不施生物炭相比，施用生物炭对0～30 cm土层土壤微生物量碳、氮含量均有促进作用，并减少0～50 cm土层土壤硝态氮残留量，使总碳和全氮含量增加22.4%和6.7%。在2022和2023年，深松下冬小麦产量较旋耕均显著增加，增幅分别为15.8%和12.0%,其中SSB2处理产量均最高。综合分析表明，深松+9 t·hm-2生物炭效果最好，是高产和提高土壤肥力的耕作与生物碳施用组合，可以应用推广。
关键词： 施用生物炭 耕作方式 冬小麦 产量 土壤碳 土壤氮
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饲粮添加非淀粉多糖酶对三层立体笼养肉鸭生长性能、屠宰性能、养分代谢率及氮排放的影响
《中国畜牧兽医 》 2025 北大核心
摘要：【目的】研究饲粮中添加非淀粉多糖酶对三层立体笼养肉鸭生长性能、屠宰性能、养分代谢率及氮排放的影响。【方法】试验采用2×3双因子试验设计，设置2个饲粮复合非淀粉多糖酶添加水平(0和500 mg/kg),3个饲养笼层位(上层、中层和下层，距离地面高度分别为1.8、1.2和0.6 m)。将体重大小一致、健康的21日龄北京鸭840只随机分为6个处理组，每个处理组10个重复，每个重复14只(公母各半),饲养阶段为21～42日龄。饲养试验结束后，记录42日龄北京鸭(空腹6 h)的体重和采食量，计算22～42日龄试验鸭平均体重、平均日增重、平均日采食量和料重比；采集42日龄北京鸭胸肌、腿肌、腹脂并称重，计算胸肌率、腿肌率、腹脂率；于试验鸭第41、42日龄收集试验肉鸭排泄物，计算营养物质表观代谢率。【结果】(1)随着饲养笼的层位下移，肉鸭42日龄体重、22～42日龄平均日增重和平均日采食量均显著降低(P<0.05);饲粮中添加复合非淀粉多糖酶可显著降低22～42日龄肉鸭平均日采食量和料重比(P<0.05)。(2)饲粮中添加复合非淀粉多糖酶和饲养笼层位对肉鸭胸肌、腿肌、腹脂重量和比率均无显著影响(P>0.05)。(3)随着饲养笼的层位下移，肉鸭粗蛋白质代谢率极显著降低(P<0.01);饲粮中添加复合非淀粉多糖酶极显著提高肉鸭能量、粗蛋白质和干物质代谢率(P<0.01),且饲粮中添加非淀粉多糖酶和饲养笼层位对肉鸭粗蛋白质代谢率存在显著的互作效应(P<0.05)。(4)随着饲养笼的层位下移，肉鸭粗蛋白质和氮摄入量极显著降低(P<0.01),氮排出量极显著升高(P<0.01);饲粮中添加复合非淀粉多糖酶极显著降低肉鸭粗蛋白质摄入量和氮排放量(P<0.01)。【结论】在肉鸭立体笼养中，饲粮中添加复合非淀粉多糖酶可降低育肥期肉鸭采食量和料重比以及提高干物质、能量和粗蛋白质代谢率，降低粗蛋白质摄入量和氮排放量；饲养笼层位显著影响42日龄肉鸭体重、平均日增重、平均日采食量和粗蛋白质代谢率、粗蛋白质摄入量、氮摄入量和氮排出量。
关键词： 非淀粉多糖酶 饲养笼层位 养分代谢率 氮排放 北京鸭
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水稻DMP1、DMP2、DMP3基因突变体的创制及其单倍体诱导能力鉴定
《中国水稻科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究水稻DMP家族基因的单倍体诱导能力，为单倍体育种提供新的基因资源。【方法】筛选与Zm DMP基因高同源且在花粉中高表达的水稻DMP家族基因作为候选基因；利用CRISPR/Cas9多基因编辑技术，在籼粳杂交稻“春优84”中对筛选的DMP家族基因和单倍体诱导基因Os MTL创制单基因敲除以及多基因组合敲除突变体；对突变体进行形态学观察和花粉育性鉴定；调查统计转基因T0材料的结实率和单倍体诱导率。【结果】在水稻RAP-DB数据库中共检索到13个玉米单倍体诱导基因ZmDMP的同源基因。Os DMP1和OsDMP2与Zm DMP同源性最高，相似度分别为41.24%和37.32%;Os DMP1和Os DMP3在花药中表达量最高。因此，选择OsDMP1、OsDMP2、Os DMP3基因为候选基因。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术创制了OsDMP1、OsDMP2、Os DMP3的单基因敲除和组合敲除突变体(osdmp1、 osdmp2、 osdmp3、 osdmp1-osdmp2、 osdmp1-osdmp3、osdmp1-osdmp2-osdmp3),Os MTL单基因敲除突变体(osmtl)，以及Os DMP1、Os DMP2、Os DMP3与OsMTL基因的组合敲除突变体(osmtl-osdmp1、osmtl-osdmp2、osmtl-osdmp3、osmtl-osdmp1-osdmp2、osmtl-osdmp1-osdmp3、osmtlosdmp1-osdmp2-osdmp3)。表型考察发现，相比较野生型，所有突变体的植株形态和花粉育性均未发生显著变化，而仅在包含osmtl的单基因敲除和多基因组合敲除突变体中结实率发生显著下降。单倍体鉴定结果显示，Os DMP1、Os DMP2、OsDMP3与Os MTL组合突变的单倍体诱导效率分别为0.4%±0.6%、2.6%±2.8%、1.4%±0.6%、1.5%±1.3%、2.1%±2.4%、2.2%±0.6%，与osmtl突变体(1.5%±0.5%)无显著差异。然而，当Os DMP家族基因单个突变或多个组合突变时均无单倍体产生。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功创制了水稻Os DMP1、Os DMP2、OsDMP3、Os MTL单基因和多基因组合敲除突变体，发现了Os DMP1、OsDMP2和OsDMP3均无独立单倍体诱导能力，也不能提升Os MTL基因的单倍体诱导效率。本研究促进了对水稻中Os DMP同源基因的了解，为后续单倍体诱导基因研究提供参考。
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桃PpCLH1基因过表达载体构建与功能鉴定
《果树学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究PpCLH1基因在叶绿素降解中的功能。果皮叶绿素降解是桃果实成熟过程中的标志性信号之一。叶绿素酶（Chlorophyllase,CLH）一直被人们认为是叶绿素降解过程中的第一种酶，CLH是参与植物叶片和果实褪绿的重要基因。然而，桃CLH基因在果皮叶绿素降解中的功能尚不清晰。【方法】以中蟠102为试验材料，克隆PpCLH1基因，分析PpCLH1的氨基酸序列，检测桃果实成熟过程中果皮PpCLH1的转录水平，研究PpCLH1基因在桃叶绿素降解过程中的功能。【结果】PpCLH1编码区全长为972 bp，编码323个氨基酸，在蔷薇科植物中表现出高度的保守性。PpCLH1基因的表达水平随着果实成熟褪绿呈现逐渐上升的趋势，在成熟前12 d达到最高，之后表达量不断降低。瞬时过表达PpCLH1基因后，烟草叶片颜色出现明显褪绿。PpCLH1是桃果皮转色期叶绿素降解的关键基因。【结论】通过对PpCLH1基因进行鉴定和功能研究，发现果实成熟前12 d PpCLH1明显高表达，在烟草叶片中瞬时过表达PpCLH1会导致叶片明显褪绿，这为进一步解析桃果实发育过程中叶绿素降解的分子机制提供了参考。
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TGase酶促对蚕蛹蛋白肽组分的鲜味增强作用及伴生危害物分析
《现代食品科技 》 2025 北大核心
摘要：该研究旨在通过转氨酶诱导糖基化制备蚕蛹蛋白糖肽，探讨其鲜味增强作用及其危害物分析。首先，以感官评分、接枝度为评价指标，在单因素试验的基础上，通过响应面优化确定TGase酶促反应的最佳条件，再比较高温美拉德反应产物（High Temperature Maillard Reaction Products, HMP）与低温酶促反应产物（Low-Temperature Enzymatic Glycosylation Reaction Products, LEP）的滋味和危害物之间的差异。结果表明，低温酶促反应的最佳工艺条件为：肽/糖比2.2:1，蛋白肽质量分数为6.5%，反应初始pH值为6.9，反应温度为50℃，TGase酶质量分数为3%，反应时间4 h。在相同浓度和糖基化程度下，HMP的丙烯酰胺含量为113.3μg/mL;5-羟甲基糠醛3.0μg/mL；糠醛1.76μg/mL,LEP的丙烯酰胺含量降低至64.05μg/mL;5-羟甲基糠醛1.96μg/mL；糠醛0.01μg/mL。LEP的三大危害物含量均显著低于HMP，证明低温酶促反应优于美拉德反应。感官结果显示HMP和LEP的滋味无显著差异，与对照组相比，LEP的感官评分显著增加，说明低温酶促反应可作为蚕蛹蛋白肽组分增鲜的另外一种有效手段，研究表明，综合危害物、感官评价结果分析，低温酶促反应对蚕蛹蛋白肽组分有增鲜和降低危害物生成的作用。
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亚麻环肽性质及呈苦机理相关研究进展
《食品科学 》 2025 EI 北大核心 CSCD
摘要：亚麻环肽是存在于亚麻籽中一类重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种功能特性。然而，部分亚麻环肽会在亚麻籽加工储藏过程中发生转化从而产生苦味，主要原因是氧化导致[1-8-NαC],[1-MetO2]-linusorb B1的结构发生变化，产物[1-8-NαC],[1-MetO]-linusorb B1呈现苦味，降低了亚麻籽相关产品的风味品质，因此限制了亚麻籽在食品产业的利用。本文对亚麻籽环肽的结构、基因和检测方法进行梳理，并结合相关研究具体阐述环肽的生物活性、呈苦机理和脱苦方法，进一步展望亚麻环肽在药物以及食品领域中的应用，提出通过萌发对亚麻环肽进行脱苦的新思路，以期为亚麻环肽理化特性及生物活性的综合调控提供理论依据。
关键词： 亚麻籽环肽 结构功能 分析方法 呈苦机理 环肽氧化 脱苦方法
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