文献类型： 中文期刊

作者： 胡风越 ¹ ; 王健 ¹ ; 王春 ¹ ; 王克剑 ¹ ; 刘朝雷 ¹ ;

作者机构： 1.中国水稻研究所水稻生物育种全国重点实验室

关键词： 水稻;单倍体诱导;DMP;Os MTL

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2025 年 39 卷 001 期

页码： 55-66

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探究水稻DMP家族基因的单倍体诱导能力，为单倍体育种提供新的基因资源。【方法】筛选与Zm DMP基因高同源且在花粉中高表达的水稻DMP家族基因作为候选基因；利用CRISPR/Cas9多基因编辑技术，在籼粳杂交稻“春优84”中对筛选的DMP家族基因和单倍体诱导基因Os MTL创制单基因敲除以及多基因组合敲除突变体；对突变体进行形态学观察和花粉育性鉴定；调查统计转基因T0材料的结实率和单倍体诱导率。【结果】在水稻RAP-DB数据库中共检索到13个玉米单倍体诱导基因ZmDMP的同源基因。Os DMP1和OsDMP2与Zm DMP同源性最高，相似度分别为41.24%和37.32%;Os DMP1和Os DMP3在花药中表达量最高。因此，选择OsDMP1、OsDMP2、Os DMP3基因为候选基因。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术创制了OsDMP1、OsDMP2、Os DMP3的单基因敲除和组合敲除突变体(osdmp1、 osdmp2、 osdmp3、 osdmp1-osdmp2、 osdmp1-osdmp3、osdmp1-osdmp2-osdmp3),Os MTL单基因敲除突变体(osmtl)，以及Os DMP1、Os DMP2、Os DMP3与OsMTL基因的组合敲除突变体(osmtl-osdmp1、osmtl-osdmp2、osmtl-osdmp3、osmtl-osdmp1-osdmp2、osmtl-osdmp1-osdmp3、osmtlosdmp1-osdmp2-osdmp3)。表型考察发现，相比较野生型，所有突变体的植株形态和花粉育性均未发生显著变化，而仅在包含osmtl的单基因敲除和多基因组合敲除突变体中结实率发生显著下降。单倍体鉴定结果显示，Os DMP1、Os DMP2、OsDMP3与Os MTL组合突变的单倍体诱导效率分别为0.4%±0.6%、2.6%±2.8%、1.4%±0.6%、1.5%±1.3%、2.1%±2.4%、2.2%±0.6%，与osmtl突变体(1.5%±0.5%)无显著差异。然而，当Os DMP家族基因单个突变或多个组合突变时均无单倍体产生。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功创制了水稻Os DMP1、Os DMP2、OsDMP3、Os MTL单基因和多基因组合敲除突变体，发现了Os DMP1、OsDMP2和OsDMP3均无独立单倍体诱导能力，也不能提升Os MTL基因的单倍体诱导效率。本研究促进了对水稻中Os DMP同源基因的了解，为后续单倍体诱导基因研究提供参考。