文献类型： 中文期刊

作者： 杨茜 ¹ ; 孟祥兵 ² ; 王春 ¹ ; 刘婷婷 ¹ ; 王克剑 ¹ ; 余泓 ² ; 饶玉春 ³ ; 邹金鹏 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院

2.中国科学院遗传与发育生物学研究所

3.浙江师范大学化学与生命科学学院

关键词： 水稻;PE技术;愈伤组织;二代测序;精准编辑;评估体系

期刊名称： 科学通报

ISSN： 0023-074X

年卷期： 2025 年 70 卷 016 期

页码： 2570-2578

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 引导编辑(prime editing, PE)作为新一代精准基因组编辑技术,能够实现任意类型碱基替换、小片段DNA插入和缺失,已成功应用于作物性状改良及新种质创制.然而,目前在某些位点上, PE编辑效率较低,无法实现预期目标编辑.因此,为了提升工作效率并加快获取目标编辑植株的速度,需建立一套完整的PE效率评估体系,用以评估不同位点的精准编辑效率.本研究选择6个已知具有不同编辑效率的PE载体,通过农杆菌介导的遗传转化法将其转化到水稻愈伤组织,随后对转化后的愈伤组织进行不同时间点连续取样,并利用高通量二代测序技术进行检测,以研究PE技术介导的精准编辑在整个愈伤组织转化过程中发生的时间和效率.实验结果显示,最早在侵染后第13天的愈伤组织中就能检测到精准编辑的发生,从第13天开始,编辑效率逐渐上升,并在第30天的愈伤组织中达到最大值.特别地,在侵染后第15天的愈伤组织中,不同位点的编辑效率与植株中的编辑效率呈良好的对应关系,因此,该时间点可用于评估植株中PE精准编辑效率.该PE效率评估体系的建立,为评估植株精准编辑效率提供了参考,有助于精准编辑在作物改良中的应用.