科研产出
甘蓝型油菜γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GCS)基因的克隆及生物信息分析
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：谷胱甘肽（glutathione, GSH）在生物体内具有抗氧化、抗衰老和重金属解毒等重要的生理功能。谷氨酸半胱氨酸连接酶（glutamate cysteine ligase, GCS）是合成谷胱甘肽的关键酶，又名γ-谷氨酰基半胱氨酸合成酶（γ-glutamylcysteine synthetase, γ-ECS）。本研究利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜（Brassica napus L.）镉低积累品种‘美国油王88’中克隆到谷胱甘肽合成酶基因GCS的2个拷贝，分别命名为Bn-GCS-1和Bn-GCS-2。序列分析表明Bn-GCS-1的ORF长度为1 536 bp，推测编码蛋白含有511个氨基酸，分子量为57.58 kD，等电点为6.02;Bn-GCS-2的ORF为1 545 bp，推测编码514个氨基酸，分子量为57.95 kD，等电点为5.90。氨基酸序列比对和进化树分析发现，Bn-GCS-1和Bn-GCS-2与其他植物同源蛋白具有较高的一致性，且与白菜型油菜和甘蓝型油菜归为一类，亲缘关系最近。2个蛋白都由保守结构谷氨酸-半胱氨酸连接酶，γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶组成，属于谷氨酰半胱氨酸连接酶家族基因。亚细胞定位预测结果表明定位在叶绿体的概率为99.8%。本研究结果为进一步分析Bn-GCS-1和Bn-GCS-2基因功能及谷胱甘肽生物合成提供了理论依据。
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基于EDEM的种窝可调式内充种花生排种器的设计与试验
《河北农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为满足不同品种的花生单粒精密播种需求，设计了1种种窝可调式内充种花生排种器，采用种窝调整盘与型孔盘相配合的工作原理，通过人工手动调节可快速调整种窝长度。利用EDEM软件对3个花生品种的种子在该排种器中的不同因素下的仿真分析，并利用MATLAB软件对仿真结果进行处理分析，确定了花生品种、种窝长度和排种器转速是影响排种质量的主要因素，获得了最优组合参数：‘四粒红’‘豫花37号’和‘豫花22号’的最佳种窝长度分别为9、12、15mm，最佳转速为40r/min；台架试验结果表明，在该组合参数下排种器的3个品种的单粒率分别为96.3%、94.6%和95.1%，重播率分别为2.1%、2.3%和2.7%，漏播率分别为1.6%、3.1%和2.2%；各项指标与仿真结果的误差较小，最大误差为2.43%，其结果均符合排种器排种性能标准，能够较好地适应不同品种花生种子的排种需求。
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不同生态条件下玉米产量影响因素分析
《作物杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：不同生态条件下环境因素是导致玉米产量差异的重要原因，为阐明不同地区产量的主要构成因素，利用不同生态区的气候环境以及逆境胁迫压力，对15份自交系和18份杂交种进行评价筛选，分析不同地区产量构成因素对产量的贡献效应，明确不同区域选择适宜高产品种的评价方法。结果表明，与产量直接相关的穗粗、行粒数、穗长、百粒重和穗位系数对产量的贡献效应大于病害和倒伏，在不同气候环境影响下，这些产量因素对产量贡献效应不同；产量最优线性回归模型中引入产量要素越多的地区，产量越高，不同生态环境下，南阳、洛阳、安阳、漯河试验点分别有5、4、4、2个与产量直接相关的因素引入最优线性方程；多地点联合鉴定表明，郑单1868和LX201在干旱胁迫后并未减产，遮阴胁迫后减产相对较少，平均产量相对较高，在本研究的试验材料中综合抗性最好。
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水果中吡唑醚菌酯残留量检测及膳食摄入风险评估
《中国果树 》 2023 北大核心
摘要：研究了枣和火龙果中吡唑醚菌酯残留量的检测方法，分析了2种水果中残留量差异，并对最终残留量进行长期膳食摄入和急性膳食摄入风险评估。样品中吡唑醚菌酯采用QuEChERS前处理方法进行提取，高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法检测；采用IBM SPSS Statistics 23软件分析2种水果中吡唑醚菌酯残留量差异，长期和急性膳食摄入评估采用膳食摄入风险评估模型进行。枣（全果）、枣（果肉）、火龙果（全果）和火龙果（果肉）中吡唑醚菌酯在最后1次施药间隔7 d时残留量分别为1.27～1.99、1.36～2.13、0.097 5～0.163 mg/kg和0.01～0.017 3 mg/kg；在最后1次施药间隔14 d时残留量分别为0.931～1.68、0.999～1.80、0.057～0.15 mg/kg和0.011 4～0.018 9 mg/kg。吡唑醚菌酯的普通人群国家估算每日摄入量为1.83 mg，占每日允许摄入量的97%。枣（儿童）、枣（成人）、火龙果（儿童）和火龙果（成人）中吡唑醚菌酯的国家估算短期摄入量分别为0.001 07、0.006 10、0.000 675、0.000 939 mg/kg bw，占急性参考剂量的百分率分别为0.152%、0.872%、0.096 4%和0.134%。按本试验的施药方式进行施药时，最终残留量差异与作物种类相关，试验水果中吡唑醚菌酯的残留量对一般人群的健康风险在可接受的范围内。
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芝麻芽菜生长特性及营养成分变化研究
《中国农学通报 》 2023 CSCD
摘要：为了明确芝麻芽菜的生长特性及营养成分变化情况，以黑白芝麻不同萌发时期（0、1.5、3、5、7、9 d）的芝麻芽为研究对象，分别对其生长特性以及粗脂肪、蛋白质、矿物质、维生素等主要营养物质的含量和变化规律进行了测定和分析。结果显示：随着芝麻萌发时间的推进，芝麻鲜重不断增加，芽后第7 d，黑白芝麻芽菜的生物产量最大，产出比均达11以上。相较于鲜芝麻芽中的粗脂肪、蛋白质、矿物质、维生素等含量逐步下降，相对干重下不同发芽阶段各营养物质含量变化规律不同。粗脂肪含量随发芽时间一直下降，而其他营养物质含量总体呈不同程度的上升趋势。其中，黑、白芝麻芽中的维生素E含量在芽后1.5 d达到最高值，分别较其籽粒增加1.62倍和1.17倍；黑、白芝麻芽中的蛋白质、磷、铁、硒等含量均在芽后第7天达到峰值，分别较其籽粒增加0.76和0.99倍、0.66和1.34倍、7.26和6.67倍以及1.67和124.49倍。综合考虑芝麻芽菜的营养品质和经济效益，萌芽第7天芝麻芽菜的营养价值和商品性最佳，此时芝麻芽菜的产量以及蛋白质、磷、铁、硒等营养物质的含量最高。本研究明确了芝麻芽菜生长过程中的生长特性和主要营养成分含量变化规律，确定了芝麻芽菜采收和食用的最佳时期，为芝麻芽菜产品的开发提供了理论依据。
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基于DUS测试性状的花生品种遗传多样性分析
《安徽农业科学 》 2023
摘要：利用NY/T 2237—2012中31个测试性状对原阳分中心参与测试的119份花生品种(待测品种及其对应近似品种)进行遗传多样性分析;采用PopGen 32软件对119参试品种进行遗传多样性分析.结果表明,22个性状共检测到97个等位变异,平均每个测试性状检测到4.41个,平均有效等位变异数为2.41,Shannon's多样性指数(H')为0.91.相关性分析表明,主茎高度与侧枝长度为极显著正相关,相关系数为0.79.荚果长度和百仁重为显著正相关,相关系数为0.63,与出仁率呈极显著负相关,相关系数为-0.65.针对该地区测试工作建议由侧枝长代替主茎高度,百仁重代替荚果长.UPGMA聚类分析显示,在阈值为0.65时可以将119份品种分为3个族群,但是通过主成分分析可以更直观地对119份材料的遗传相似性的判断.综合分析说明,参与测试的花生品种具有较丰富的形态多样性.
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狂犬病毒GSQY-Dog-China-2013株全基因组序列测定和遗传进化分析
《中国兽医杂志 》 2023 北大核心
摘要：为了全面分析我国狂犬病病毒遗传进化情况，本试验使用反转录PCR（RT-PCR）方法将狂犬病病毒GSQY-Dog-China-2013分为10个片段进行扩增，回收目的片段并与pMD20-T simple载体连接，转化JM109感受态细胞，挑取阳性克隆进行测序；使用DNASTAR软件中的Edit Seq通过拼接相邻片段之间的重叠序列获得GSQY-Dog-China-2013全基因组序列，构建系统进化树进行遗传进化分析。结果显示，GSQY-Dog-China-2013全长11 924核苷酸（nt）,包含5个开放阅读框，分别编码核蛋白（N）、磷蛋白（P）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）和转录大蛋白（L）;基于全基因组序列的进化树分析显示，GSQY-Dog-China-2013株和国内分离株形成一个分支，在国内分离株中与SXYL15株和SXBJ15株形成一个分支，亲缘关系最接近，提示GSQY-Dog-China-2013可能源自我国陕西省。本试验系甘肃省首次报道狂犬病病毒全基因组序列，进一步丰富了我国狂犬病病毒遗传进化数据，为狂犬病全面防治以及疫苗研发提供了数据支持。
关键词： 狂犬病病毒 GSQY-Dog-China-2013 全基因组序列测定 遗传进化分析
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白的真核表达及其活性鉴定
《河南农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为制备猪伪狂犬病病毒（PRV）gE重组蛋白并评估其抗原活性，将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签，构建真核表达质粒pCMV-gE；将重组质粒转染HEK293F细胞，Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达；利用镍亲和层析和凝胶过滤层析从转染细胞培养上清中纯化gE表达蛋白；以SDS-PAGE和Western blot鉴定gE重组蛋白，利用PRV阳性血清以ELISA分析gE重组蛋白的抗原活性，通过去糖基化酶PNGase F鉴定其糖基化修饰及其对抗原活性的影响。Dot blot结果显示，gE重组蛋白通过自身信号肽实现在细胞培养上清的分泌表达，其表达量在转染96 h达到峰值。SDS-PAGE和Western blot结果显示，从细胞培养上清中纯化获得gE重组蛋白纯度约为90%，经去糖基化酶PNGase F处理的gE重组蛋白分子质量显著降低。间接ELISA结果显示，gE重组蛋白检测PRV阳性血清的抗体效价为1∶12 800;PRV阳性血清对gE蛋白的检出限为31.25 ng/mL，其抗原活性是原核表达的4倍。对临床血清的检测结果显示，基于gE重组蛋白的ELISA与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率为96.5%。综上，在真核细胞中分泌表达了具有高表达量、高纯度、高活性和糖基化修饰的gE重组蛋白，在PRV感染鉴别检测中具有良好的应用潜力。
关键词： 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 分泌表达 糖基化修饰 抗原活性
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玉米应用核心种质的构建与应用
《植物遗传资源学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：应用核心种质是针对解决育种问题而建立的成套优异种质集合，也是种质资源研究紧密衔接作物育种的体现形式。鉴于玉米核心种质研究现状，明确了玉米应用核心种质的基本范畴和特征，提出在玉米核心种质资源的基础上，进一步融入重要育种性状的优异等位基因，构建分别适应不同生态区、杂种优势类群明确、所含优异等位基因清晰、无明显遗传累赘的应用核心种质，将是今后玉米种质资源研究的工作重点。最后，对玉米应用核心种质构建的关键问题进行了论述，以期推动我国玉米应用核心种质构建相关工作的高效发展，使其能够在较长的一段时间内对我国玉米育种研究提供有效的物质和信息支撑。
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夏玉米上施用尿素硝酸铵肥料增产效果及氮肥表观利用率研究
《腐植酸 》 2023
摘要：为了明确尿素硝酸铵（UAN）肥料减量优化施用对夏玉米产量和氮肥表观利用率及土壤环境的影响，选用夏玉米“郑单958”，在河南省褐土上进行。结果表明，UAN肥料在夏玉米上施用增产效果显著，和同等用量尿素相比，夏玉米增产292.3 kg/hm~2，增产率3.37%；和常规施尿素相比，肥料用量减少45 kg/hm~2，夏玉米产量增加652.53 kg/hm~2，增产率7.86%。在减量施肥方面，UAN肥料80%施氮量和优化施尿素相比，肥料用量减少30 kg/hm~2，夏玉米产量无显著差异；和常规施尿素相比，肥料用量减少75 kg/hm~2，夏玉米产量显著增加379.5 kg/hm~2，增产率4.57%；说明减量施用UAN肥料在夏玉米上施用可以稳产。UAN肥料中添加元素锌时，与同等用量UAN肥料相比，夏玉米产量无显著差异。在氮肥表观利用率方面，施用UAN肥料显著提高夏玉米的氮肥表观利用率。在环境保护方面，施用UAN肥料土壤不同土层硝态氮含量均显著降低。
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