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鸭TNNI1基因启动子克隆及其活性分析

文献类型: 会议论文

第一作者: JI Gai-ge

作者: JI Gai-ge 1 ; 姬改革 1 ; LIU Yifan 1 ; 刘一帆 1 ; SHAN Yan-ju 1 ; 单艳菊 1 ; ZHANG Ming 1 ;

作者机构: 1.江苏省家禽科学研究所,扬州225125

关键词: 鸭;TNNI1基因;启动子;基因克隆;活性分析

会议名称: 江苏省畜牧兽医学会首届“青年科技论坛”

主办单位: 江苏省畜牧兽医学会

页码: 00000596-00000607

摘要: 目的:旨在通过克隆鸭慢速骨骼肌型肌钙蛋白I1(Slow skeletal muscle troponin I1,TNNI1)基因5'侧翼区序列,进行活性区域分析,初步探索TNNI1基因转录调控机制. 方法:采用染色体步移方法克隆测序获得鸭TNNI1基因5'侧翼区序列,采用在线生物信息软件进行转录因子结合位点分析,构建全长及系列缺失报告基因表达载体,转染293T细胞,采用双荧光素酶系统检测不同缺失片段的启动子活性. 结果:结果,克隆获得鸭TNNI1基因5'侧翼区序列2078bp,预测存在TBP、C/EBP、SP1、MyoD,MRF4、YY1等多个转录因子的结合位点和2个CpG岛.双荧光素酶活性分析发现,随着启动子5'侧翼区序列的截短,荧光素酶活性逐渐下降,但均极显著高于pGL3-Basic空载体(P<0.01),其中-2078/-1bp片段启动子活性最强.-2078/-1695bp区域为核心启动子区域,-469/-1bp区域具备基本的启动子活性,-1695/-885bp区域可能存在正调控元件,-885/-469bp区域可能存在负调控元件. 结论:结果表明,克隆获得的鸭TNNI1基因5'侧翼区序列具有启动子活性,确定了核心启动子区和主要调控区域,为进一步研究鸭肌肉组织中TNNI1基因的表达调控奠定了基础.

分类号: S834.2

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