文献类型： 会议论文
第一作者： 谢雨辰
作者： 谢雨辰 1 ; 蒋涛 2 ; 朱娟 1 ; 赵珊珊 2 ; 唐顺明 1 ; 沈兴家 2 ;
作者机构： 1.江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212018
2.中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点实验室,江苏镇江212018
关键词： 家蚕;滞育性状;山梨醇脱氢酶;基因调控;启动子活性
会议名称： 全国农业生物化学与分子生物学第十四届学术研讨会
主办单位： 中国生物化学与分子生物学会
页码： 99-106
摘要： 山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase,SDH)是山梨醇转化为糖原的关键酶,家蚕卵中山梨醇含量的变化与卵期滞育的发动、持续和停止有着密切的平行关系.家蚕有3个SDH基因,分别为BmSDH-1、BmSDH-2a和BmSDH-2b.为了研究家蚕BmSDH启动子的特性,设计特异性引物,以二化性(bivoltine,bvt)品种秋丰基因组DNA为模板,PCR扩增得到3个BmSDH约1.0Kb的启动子片段;以pGL3.0 basic质粒为载体,分别构建由BmSDH启动子片段驱动荧光素酶报告基因(luc)表达载体pGL3-BmSDH-1-bvt-1074,pGL3-BmSDH-2a-bvt-1082和pGL3-BmSDH-2b-bvt-1175;分别转染家蚕卵巢来源的BmN细胞,以转染的BmN细胞为对照,分析luc表达水平,并以此衡量BmSDH启动子片段的活性,结果显示:同样长度的BmSDH-2a启动子活性明显高于BmSDH-2b和BmSDH-1的启动子活性,分别是后者的9.7倍和21.0倍,暗示家蚕体内山梨醇脱氢酶活性主要来自BmSDH-2a的表达.为了进一步研究BmSDH-2a基因启动子的特性,分别克隆二化性品种BmSDH-2a 674 bp和355 bp的启动子片段,构建不同长度的BmSDH-2a启动子片段控制的报告质粒pGL3-BmSDH-2a-bvt-674和pGL3-BmSDH-2a-bvt-355,并与pGL3-BmSDH-2a-bvt-1082分别转染BmN细胞,结果显示:BmSDH-2a的355bp启动子活性明显高于674 bp和1082 bp的启动子,分别是它们的1.3倍和3.3倍,提示在BmSDH-2a启动子-355 bp～-674bp和-674 bp--1082 bp之间存在负调控元件.
分类号： S881.2
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