您好，欢迎访问中国农业科学院 机构知识库！

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

SARS-CoV-2中和性纳米抗体的原核表达及中和活性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 王海宁 1 ; 刘兴健 2 ; 高新桃 2 ; 李轶女 2 ; 沈兴家 1 ; 张志芳 2 ; 易咏竹 1 ;

作者机构： 1.江苏科技大学生物技术学院

2.中国农业科学院生物技术研究所

关键词： 纳米抗体;大肠杆菌;新冠病毒;中和试验

期刊名称： 生物技术进展

ISSN： 2095-2341

年卷期： 2022 年 12 卷 005 期

页码： 754-759

摘要： 纳米抗体(nanobody,Nb)作为目前已知的能与目标抗原结合的最小单位抗体,在生物医药、临床研究等方面具有良好的应用前景.根据大肠杆菌密码子偏好性优化合成严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome-coronavirus 2,SARS-CoV-2)中和性纳米抗体H11-D4基因,将其克隆到pET28a表达载体上后,转化至大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE3)进行诱导表达,通过镍柱纯化、质谱分析、Western Blot鉴定H11-D4的表达情况并使用中和试验验证其中和活性.研究结果显示,纳米抗体H11-D4可成功在大肠杆菌中表达,最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0mmol·L-1,37℃诱导5h.H11-D4抗体的分子量大小约为17.9kD,与预测值相符.经镍柱纯化后,产量为25.16 mg·L-1.透析复性后利用TritonX-114快速有效地去除了内毒素,中和试验成功验证了 H11-D4的中和活性(IC50)为171.1 nmol·L-1,研究结果可为纳米抗体的原核表达和新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)的预防及治疗提供基础数据支撑.

  • 相关文献

[1]禽流感高免球蛋白的制备及应用研究. 李雁冰,李海燕,辛晓光,田国彬,冯菊艳,唐秀英,于康震. 2002

[2]牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立. 朱远茂,王海燕,薛飞,辛九庆,赵立平,童光志,郭巍,李兆利,相文华. 2005

[3]市场与养殖场果子狸血清SARS冠状病毒抗体的研究. 涂长春,GaryCrameri,孔宪刚,陈金顶,孙彦伟,向华,雷连成,高玉伟,夏咸柱,刘胜旺,任涛,BryanT.Eaton,宣华. 2004

[4]猪流行性腹泻病毒血清中特异性IgG抗体间接ELISA检测方法的建立. 谷长维,谷长乐,胡博. 2022

[5]鸭肝炎病毒1型“自杀性”DNA疫苗的构建及其免疫评价. 付玉志,李传峰,陈宗艳,刘光清. 2012

[6]两种阿卡斑病毒抗体ELISA检测方法的建立与初步应用. 刘晓婧,王芳,赵权,于力. 2014

[7]猪伪狂犬病高免血清的制作与初步应用. 孔令达,符芳,于辉,崔尚金,仇华吉,韩英. 2004

[8]鸭黄病毒抗体的化学发光免疫检测方法的建立. 郑小龙,赵明,王群,孙涛,岳志芹. 2015

[9]牛伪狂犬病的实验室诊断. 汤明,冉智光,熊仲良,蒋茹,高亚琼,方兵兵,何启盖,孔令达,陈焕春. 2002

[10]鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒的稳定性及SPF雏鸡免疫试验. 周继章,邱昌庆,张小英,蔺国珍,曹小安,张琳,程淑敏. 2007

[11]狐狸传染性脑炎中和试验监测方法的建立和应用. 柴秀丽,闫喜军,姜莉莉,吴威,丛丽,邵西群,王凤雪. 2006

[12]卵泡刺激素受体FSHR234纳米抗体的分离纯化及多克隆抗体的制备. 李玲霞,吴锦艳,曹小安,冯倩,杜国玉,尹双辉,李江伟,尚佑军. 2018

[13]基于纳米抗体的可再生免疫亲和柱结合高效液相色谱-串联质谱法测定玉米中的黄曲霉毒素B1. 李志强,黄雅涓,张文,张奇,李培武,唐晓倩. 2024

[14]猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体的筛选 及其鉴定. 宋欢,孙明霞,尹坤,温永俊,刘永刚,蔡雪辉. 2019

[15]SARS-CoV-2核糖体展示纳米抗体文库的构建与筛选. 王馨悦,韩秋雪,王振山,焦翠翠,毕津豪,许梦园,赵永坤,冯娜,王铁成,迟航,杨松涛,夏咸柱. 2022

[16]纳米抗体筛选技术研究进展. 唐秀兰,邓安琦,陈文聪,赵妍,王茂鹏,李昌. 2024

[17]纳米抗体及其在动物传染病防控中的应用. 李甜甜,邓效禹,李智杰,许丽文,孙亚杰,胡博,白雪. 2024

[18]纳米抗体应用的研究进展. 卢炳州,曹伟军,郑海学,杨孝朴. 2016

[19]纳米抗体结构特征与制备研究进展. 孔静,郑楠,王加启,赵圣国. 2024

[20]新型鹅星状病毒ORF2蛋白纳米抗体的筛选及鉴定. 王丹,吉艳红,梁世蕊,杨洁,朱启运. 2023

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：中国农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台