文献类型： 中文期刊

作者： 王忆 ¹ ; 巩建飞 ¹ ; 衡诺 ¹ ; 胡樱凡 ¹ ; 王蕊 ¹ ; 王欢 ¹ ; 朱妮 ¹ ; 何维 ¹ ; 胡智辉 ¹ ; 郝海生 ¹ ; 朱化彬 ¹ ; 赵善江 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词： 褪黑素;棕榈酸;牛子宫内膜上皮细胞;线粒体动力学;凋亡

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2024 年 55 卷 009 期

页码： 3978-3987

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在探究褪黑素对棕榈酸（palmitic acid, PA）诱导的牛子宫内膜上皮细胞（bovine endometrial epithelial cells, BEECs）线粒体动力学的影响及机制。本试验以BEECs为研究对象，分为3组：对照组、PA组和褪黑素组，其中，对照组添加0.2 mmol·L^-1 BSA溶剂，PA组添加0.2 mmol·L^-1 PA,褪黑素组同时添加0.2 mmol·L^-1 PA和100 nmol·L^-1褪黑素。本研究通过CCK8法（n=4）和Annexin V-FITC/PI双染法（n=3）检测细胞活力和凋亡情况；利用细胞流式术检测细胞线粒体内的ROS水平（n=3）;进一步使用Seahorse XFe96细胞代谢呼吸动态分析仪检测耗氧率、基础呼吸值、ATP合成能力等线粒体呼吸功能的相关指标（n=4）;qRT-PCR法检测线粒体动力学相关基因MFN1、DRP1和PGC1-α的mRNA表达变化量（n=3）;最后通过Western-Blot法检测线粒体动力学相关蛋白MFN1、p-DRP1、DRP1和PGC1-α的表达变化量（n=3）。结果显示：与PA组相比，1)添加褪黑素能显著降低BEECs线粒体ROS水平（P<0.05）,并显著提高BEECs活力和显著降低BEECs凋亡率（P<0.05）;2)Seahorse结果提示，添加褪黑素能显著提高线粒体基础呼吸值、ATP产量和最大耗氧量（P<0.05）,此结果表明褪黑素能改善线粒体功能，促进线粒体有氧呼吸，增加ATP产量；3)qRT-PCR结果表明，添加褪黑素能显著降低MFN1、DRP1的mRNA表达量，显著提高PGC1-α的mRNA表达量（P<0.05）;4)Western-Blot检测发现褪黑素组中MFN1蛋白表达量显著下降（P<0.05）,p-DRP1/DRP1和PGC1-α蛋白表达量显著上升（P<0.05）。综上，本研究表明褪黑素可能通过改善BEECs线粒体动力学功能，从而缓解PA诱导下的线粒体氧化应激和提高线粒体呼吸功能，最终增强BEECs活力和降低BEECs凋亡；本研究初步探究了褪黑素对PA诱导BEECs损伤的作用机制，为提高严重NEB奶牛低繁殖力提供了理论依据。