文献类型： 中文期刊

作者： 邹万成 ¹ ; 陈竞 ¹ ; 李沛恒 ¹ ; 李乐天 ¹ ; 蔡锦顺 ¹ ; 金宁一 ¹ ;

作者机构： 1.延边大学农学院;中国农业科学院长春兽医研究所

关键词： 集成干扰素;序列;干扰素α;抗病毒

期刊名称： 中国生物制品学杂志

ISSN： 1004-5503

年卷期： 2024 年 06 期

页码： 739-744+750

收录情况： CSCD

摘要： 目的 构建1条新的人集成干扰素α(consensus interferon α,cIFNα)序列，并验证其抗病毒效果。方法 综合57条人源IFNα序列，经软件比对分析选出各个位点保守氨基酸偏好性，人工合成新的cIFN序列hIC至pUC-57载体中，与pCK连接，构建真核表达载体pCK-hIC，转染293T细胞表达目的蛋白hIC；于增强型绿色荧光蛋白水疱性口炎病毒(enhanced green fluorescent protein vesicular stomatitis virus,VSV-EGFP)感染A549细胞前后用其孵育细胞，经荧光观察、结晶紫染色和流式细胞术体外分析hIC对VSV-EGFP复制的影响，并通过qPCR法验证IFN下游基因的表达。结果质粒pCK-hIC经双酶切及测序鉴定证明构建正确。表达的hIC蛋白相对分子质量约27 000，能明显降低VSV-EGFP的荧光表达，明显抑制病毒增殖，并可激活IFN刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG15)、2′-5′寡腺苷酸合成酶1(2′-5′-oligoadenylate synthetase 1,OAS1)、IFN诱导跨膜蛋白(interferon-inducible transmembrane protein,IFITM)的表达。结论 hIC具有良好的抗病毒效果，为后续研究及开发奠定了基础。