文献类型： 中文期刊
作者： 赵仁双 1 ; 朱羿龙 1 ; 尚超 1 ; 韩继成 1 ; 刘子睿 1 ; 修志儒 1 ; 李善智 1 ; 李雅茹 1 ; 杨霞 1 ; 李霄 1 ; 金宁一 1 ; 金鑫 1 ; 李一权 1 ;
作者机构： 1.延边大学农学院预防兽医学实验室;长春中医药大学院士工作站;中国农业科学院长春兽医研究所
关键词： 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2);天坛株痘苗病毒;TK基因;同源重组
期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志
ISSN： 1007-8738
年卷期： 2024 年 40 卷 001 期
页码： 19-25
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的 构建重组痘苗病毒载体疫苗rVTT△TK-RBD,并评价其安全性和免疫原性.方法 参考严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)基因序列合成受体结合域(RBD)基因,并将其插入自主构建的重组质粒pSTKE的多克隆位点上,构建重组痘苗病毒穿梭载体pSTKE-RBD,并转染到预先感染天坛株痘苗病毒(VTT)的BHK-21细胞内,经多轮的荧光噬斑筛选成功获得重组痘苗病毒rVTT△TK-RBD;通过滴鼻方式免疫小鼠后,检测rVTT△TK-RBD对BALB/c小鼠体质量的影响;通过肌肉免疫小鼠后,分析rVTT△TK-RBD对BALB/c小鼠产生的特异性抗体和中和抗体的水平;通过流式细胞术检测rVTT△TK-RBD对BALB/c小鼠T细胞亚群的影响.结果 利用同源重组、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)筛选标记和多次荧光噬斑筛选,成功筛选获得了表达RBD的胸腺激酶(TK)基因缺失型重组痘苗病毒rVTT△TK-RBD,且PCR验证成功.BALB/c小鼠体内实验表明rVTT△TK-RBD具有较好的抗SARS-CoV-2的免疫原性且相比于亲本株VTT明显降低了对机体的毒性作用.结论 成功构建并获得SARS-CoV-2重组痘苗病毒疫苗rVTT△TK-RBD并通过各项试验证明其安全性和免疫原性.
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