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MDCK细胞中IFN-γ诱导的免疫相关GTP酶在弓形虫PVM表面的定位研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李琦 1 ; 张朝霞 2 ; 谷昊容 3 ; 曹亮; 贾洪林; 王春仁;

作者机构： 1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

3.黑龙江省农垦总局动物卫生监督所

关键词： 弓形虫;Irgb11;γ-干扰素;纳虫空泡膜

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 6 期

页码： 590-594

摘要： 为探究犬MDCK细胞中γ-干扰素(IFN-γ)诱导的免疫相关的GTP酶在刚地弓形虫(T.gondii)的纳虫空泡膜表面的定位情况,本研究采用慢病毒包装载体将免疫相关的GTP酶(Irgb11)与GFP的融合基因(Irgb11-GFP)引入犬MDCK细胞中,经荧光鉴定和western blot检测到Irgb11-GFP融合蛋白的表达,表明构建了过表达Irgb11的细胞系.采用IFN-γ诱导该细胞系24 h后,接种弓形虫PLK株,以间接免疫荧光试验检测,并通过激光共聚焦扫描显微镜观察,结果显示Irgb11-GFP蛋白获得表达并能够与弓形虫PLK株的纳虫空泡膜(PVM)发生共定位,表明在IFN-γ存在的情况下,犬MDCK细胞中的Irgb11可以被募集到弓形虫PVM表面,从而发挥其破坏弓形虫PVM的功能.本实验为进一步研究犬细胞中抑制弓形虫生长的机制奠定基础.

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