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鞘氨醇胞菌B1咔唑降解基因carB的克隆与功能研究

文献类型： 中文期刊

作者： 边晨凯 1 ; 张宇 2 ; 陈度宇 2 ; 王森 2 ; 许雷 3 ;

作者机构： 1.中国农业科学院研究生院

2.;中国农业科学院研究生院

3.;中国农业科学院研究生院;

关键词： 咔唑;鞘氨醇胞菌;降解基因;酶学性质

期刊名称： 中国农业科技导报

ISSN： 1008-0864

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 56-64

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以分离到的咔唑高效降解菌鞘氨醇胞菌B1为材料,研究该菌株咔唑降解基因簇的组成和表达模式,阐释咔唑降解过程中关键酶的作用机理。通过分析不同菌株咔唑降解基因簇中基因的保守区,从菌株B1中成功克隆得到基因簇中car Aa、car Ba、car Bb和car C基因片段。通过RT-PCR证实菌株B1的咔唑降解基因簇为诱导表达。通过同源克隆得到降解关键基因car B和编码两个亚基的car Ba、car Bb基因,并在大肠杆菌中进行了异源表达。以2,3-二羟基联苯为底物,对Car B粗酶液进行了酶学性质分析。研究表明Car B蛋白催化最适p H和温度分别为7.4和30℃,Fe2+能显著提高酶的催化活力。

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