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猪伪狂犬病病毒gB蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 马国祥 1 ; 曹丽艳 2 ; 张娟 1 ; 张宇 2 ; 万颖 2 ; 孔祥雨 2 ; 李想通 2 ; 王娅婷 2 ; 段月月 2 ; 袁聪 2 ; 施磊 2 ; 郭庆勇 1 ; 翟少华 1 ; 郑海学 3 ; 王琦 2 ;

作者机构: 1.新疆农业大学动物医学学院

2.中国农业科学院都市农业研究所

3.中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词: 猪伪狂犬病病毒;gB蛋白;原核表达;单克隆抗体

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2024 年 008 期

页码: 1065-1071

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gB蛋白单克隆抗体,本研究利用原核表达系统表达gB蛋白的主要抗原区(540~734 aa),获得重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用杂交瘤技术,经过细胞筛选和亚克隆,获得1株能稳定分泌抗gB蛋白的单克隆抗体,将其命名为1C10。经间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blot)验证,1C10具有良好的特异性,能识别PRV感染细胞时表达的gB蛋白。亚类鉴定结果表明,1C10重链为IgG2a型,轻链为kappa型。ELISA结果表明,纯化后的腹水效价高于1∶128 000。综上,本研究成功表达了PRV gB蛋白,并制备了抗PRV gB蛋白单克隆抗体,为进一步探究PRV gB蛋白的结构和功能以及后期建立PRV诊断方法及致病机制的研究奠定了基础。

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