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猪伪狂犬病病毒US9和US2蛋白原核表达及多克隆抗体制备

文献类型: 中文期刊

作者: 张娟 1 ; 张宇 2 ; 曹丽艳 2 ; 段月月 2 ; 李璐瑶 1 ; 袁聪 2 ; 孔祥雨 2 ; 郑海学 2 ; 王琦 2 ;

作者机构: 1.新疆农业大学动物医学学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词: 猪伪狂犬病病毒;US9蛋白;US2蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2025 年 55 卷 008 期

页码: 1071-1078

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 多种商品化猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗毒株基因组缺失US9和US2基因。为探究US9和US2蛋白在鉴别PRV野毒株感染及疫苗毒株免疫的猪血清,以及抗US9和US2蛋白多克隆抗体在鉴别PRV野毒株及疫苗毒株感染细胞的可行性,本研究通过原核表达系统表达PRV US9和US2蛋白,纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体。研究结果表明,经纯化处理的US9和US2蛋白在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)中表现出特异性识别能力,能够与感染野毒株PRV CD22的猪血清发生免疫反应,但与接种疫苗毒株PRV Bartha-K61的猪血清不反应。此外,试验制备的小鼠抗US9和US2蛋白多克隆抗体在蛋白质印迹试验(Western-blot)和间接免疫荧光试验(IFA)中均能特异性识别PRV CD22感染的细胞,而不与疫苗毒株PRV Bartha-K61感染的细胞发生反应。本研究成功获得了具有鉴别诊断价值的PRV US9和US2蛋白及其多克隆抗体,为深入探索PRV US9和US2蛋白的功能特性,以及开发基于PRV疫苗毒株的新型诊断试剂奠定了重要基础。

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