文献类型： 中文期刊

作者： 曹丽艳 ¹ ; 孔祥雨 ¹ ; 袁聪 ¹ ; 段月月 ¹ ; 马国祥 ¹ ; 施磊 ¹ ; 张宇 ¹ ; 万颖 ¹ ; 李想通 ¹ ; 王娅婷 ¹ ; 杜煜 ¹ ; 郑海学 ² ; 王琦 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院都市农业研究所

2.中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词： 猪急性腹泻综合征冠状病毒;N蛋白;6E8单克隆抗体;表位鉴定

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年 56 卷 004 期

页码： 1854-1864

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)是一种蝙蝠来源的新型猪肠道冠状病毒，可引起新生仔猪腹泻、呕吐、脱水而死亡。SADS-CoV核衣壳蛋白(N)是病毒复制中最保守的结构蛋白，具有良好的抗原性。前期研究获得的5株抗SADS-CoV N蛋白的单克隆抗体(1C10、4B10、6G1、6F3和6E8),其中6E8与SADS-CoV的反应性最强。在本研究中，利用pET32a作为表达载体构建N蛋白的截短及缺失突变体质粒，经诱导表达后，用6E8进行抗原抗体反应。Western blot结果表明，6E8识别的抗原表位为69-QKGQRK-74。同源性分析结果显示，该表位在不同SADS-CoV毒株和蝙蝠冠状病毒HKU2中完全一致；在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猫感染性腹膜炎病毒(FIPV)中发现相似的表位(VKGQRK),仅有一个氨基酸的差异；而在其他冠状病毒中同源性较低。特异性试验中，6E8不能与猪流行性腹泻冠状病毒(PEDV)和TGEV发生发应，尽管6E8识别表位与TGEV仅有一个氨基酸的差异，这说明69-Q是6E8识别表位的关键氨基酸。进一步试验发现，当6E8与SADS-CoV孵育后再感染Huh7细胞，能增强SADS-CoV的感染，出现抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement, ADE)现象。总之，SADS-CoV N蛋白新型B细胞表位的鉴定，将为设计SADS-CoV新型疫苗和开发表位相关的诊断试剂提供新的见解。