文献类型： 中文期刊

作者： 胡明雪 ¹ ; 林雨萌 ² ; 刘长军 ² ; 高宏雷 ² ; 崔红玉 ² ; 祁小乐 ² ; 高立 ² ; 王素艳 ² ; 陈运通 ² ; 王春凤 ¹ ; 张艳萍 ² ; 高玉龙 ² ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物医学院/动物微生态制剂工程研究中心

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 鸡传染性贫血病毒;分离;鉴定;致病性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 006 期

页码： 568-575

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为鉴定来自山东某种鸡场196日龄疑似鸡传染性贫血病毒（CAV）感染的2份种鸡肝脏样品的致病原，本实验利用马立克病肿瘤淋巴母细胞（MDCC-MSB1细胞）对2份肝脏样品进行病毒的分离培养与传代，每代均观察细胞是否出现细胞病变（CPE）。将传至5代的病毒液分别采用PCR和间接免疫荧光试验（IFA）鉴定，PCR结果显示，扩增到与CAV JL17株阳性对照一致的约600 bp的目的条带；IFA结果显示，感染分离病毒与JL17株阳性对照的细胞均出现绿色荧光，而阴性对照既未扩增到目的条带也无绿色荧光。上述结果表明分离到一株CAV，命名为SDNN2022。为分析SDNN2022株的分子特征，采用PCR扩增其VP1基因并测序，采用DNAStar软件对SDNN2022株VP1基因与GenBank登录的39株CAV参考株VP1基因序列进行同源性分析；采用Megalign分析SDNN2022株VP1的氨基酸序列，构建SDNN2022株VP1基因的进化树。VP1基因的同源性结果显示，SDNN2022株与CAV参考株的VP1基因序列的同源性为95.0%～99.8%，其中与CAV参考株JS2020-PFV的同源性最高；SDNN2022株VP1高变区的氨基酸位点（aa139～aa151）与大多数强毒株一致。但在aa89、aa92、aa411和aa417与大多数CAV参考株不同，均发生了氨基酸突变，分别为T⁸⁹K、G⁹²D、S⁴¹¹T和V⁴¹⁷I，其中后两个位点的突变为本研究首次发现。SDNN2022株与CAV强毒参考株CUX-1的aa394均为谷氨酰胺，符合CAV强毒的分子特征，表明SDNN2022株为一株CAV强毒株。VP1基因的进化树结果显示，分离株SDNN2022与CAV参考株CUX-1、JS2020-PFV、CAV-JL190130等聚为一支，且与JS2020-PFV株的遗传距离最近，均属于A群，进一步表明SDNN2022株为一株强毒株。将该株病毒分别感染6胚龄SPF鸡胚和14日龄SPF雏鸡进行致病性试验，结果显示，SDNN2022株对鸡胚的致死率为30%（3/10），病死鸡胚体的肝脏黄化；该株病毒感染14日龄SPF雏鸡后7 d出现精神萎靡、呆滞、羽毛凌乱等临床症状，发病率为83.3%（5/6），但无死亡；感染后14 d，与空白对照组鸡相比，感染组鸡体重显著降低（P<0.05），胸腺明显萎缩，且胸腺指数极显著降低（P<0.01）。本研究分离到一株强毒力CAV，且对SPF鸡胚和雏鸡均具有较强的致病性，丰富了国内CAV的病毒资料，为深入研究CAV的致病机制提供了数据支持。