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利用酵母随机展示文库筛选与鉴定基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白B细胞抗原表位

文献类型： 中文期刊

作者： 刘欢欢 1 ; 向志达 2 ; 叶十一 1 ; 郭利伟 2 ; 刘恒贵 3 ; 熊涛 1 ;

作者机构： 1.长江大学生命科学学院

2.长江大学动物科学学院

3.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

关键词： 新城疫病毒;HN蛋白;B细胞表位;酵母随机展示文库

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 010 期

页码： 1263-1270

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)给全世界家禽养殖业造成了严重的经济损失.HN蛋白是NDV上的重要囊膜蛋白,能诱导鸡体内的免疫系统产生保护性抗体.为了鉴定HN蛋白上的B细胞表位,本研究成功构建了基因Ⅶ型NDV HN蛋白的酵母随机展示文库,该文库的库容量为5*105 CFU,插入的片段随机分布.利用NDV高免血清标记HN蛋白的酵母随机展示文库,然后通过流式细胞分选技术分选阳性克隆细胞进行测序分析.结果显示,阳性文库中150号多肽(GAPVHDPDYIGGIGKE)含量很高.对150号多肽进行截短分析,结果表明该多肽中VHDPDYIGGI序列为最小的B细胞表位,该表位能与感染NDV的高免血清普遍反应.因此,VHDPDYIGGI多肽是基因Ⅶ型NDV HN蛋白中广泛存在的B细胞表位.本研究结果为将来开发新城疫新型ELISA检测试剂盒以及表位疫苗奠定了基础.

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