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猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用

文献类型： 中文期刊

作者： 孙岩 1 ; 闫丽辉 1 ; 史林林 1 ; 关野 1 ; 刘恒贵 1 ; 孙建宏 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物卫生检测中心

关键词： 猪鼻支原体;荧光PCR;方法建立

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 53 卷 002 期

页码： 176-181

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)快速荧光PCR检测方法,本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒,根据该基因设计荧光PCR引物和探针,并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测.结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别猪鼻支原体基因组外,对猪的基因组和猪常见病原的基因组均不发生交叉反应.在敏感性和重复性试验中,该方法对猪鼻支原体的检测限为1000 copies/mL,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性.用该方法检测临床样本,阳性检出率为76%(38/50),远高于普通PCR的阳性检出率(40%,20/50).上述结果表明,本研究建立的荧光PCR方法在特异性、敏感性和稳定性方面均满足猪鼻支原体的临床检测要求,可以用于猪鼻支原体临床样品的检测.

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