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玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01突变体文库的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 朱子薇 1 ; 潘丽婷 2 ; 周义东 2 ; 王燕霞 2 ; 史建荣 2 ; 洪青 2 ; 徐剑宏 3 ;

作者机构: 1.南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全风险评估实验室(南京)/江苏省转基因安全评价公共服务中心/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心

2.;南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全风险评估实验室(南京)/江苏省转基因安全评价公共服务中心/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心

3.;南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全风险评估实验室(南京)/江苏省转基因安全评价公共服务中心/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心;

关键词: 玉米赤霉烯酮;Bacillus amyloliquefaciens MQ01;转座子突变;突变体文库

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2017 年 02 期

页码: 456-462

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 构建玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01突变体文库,以期获得丢失玉米赤霉烯酮降解功能的突变子,克隆玉米赤霉烯酮降解酶基因,阐明MQ01降解玉米赤霉烯酮的分子机制。将携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA电转化至玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01中,50℃高温条件下,把穿梭载体pMarA上转座子TnYLB-1随机插入到菌株MQ01基因组中,获得转座子插入突变的阳性克隆,构建MQ01菌株的突变体文库,随机挑选突变子采用PCR和Southern杂交方法进行验证。本研究成功获得了3 000多个TnYLB-1转座子插入突变的阳性克隆,构建了B.amyloliquefaciens MQ01的突变子文库,结果显示TnYLB-1转座子以单拷贝的形式随机插入到B.amyloliquefaciens MQ01的基因组DNA中,从而可以从转座子突变文库中筛选丢失玉米赤霉烯酮降解功能的转座突变子,从菌株MQ01中克隆玉米赤霉烯酮降解酶基因。

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