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SYBR Green II荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔病毒性出血症病毒方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 谭永贵 1 ; 刘腾 1 ; 朱杰 1 ; 郭慧敏 1 ; 吴巧梅 1 ; 李琦 1 ; 缪秋红 1 ; 陈宗艳 1 ; 李传峰 1 ; 刘光清 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词: 兔病毒性出血症病毒;荧光定量PCR;熔解曲线;鉴别

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2017 年 25 卷 01 期

页码: 7-11

收录情况: 北大核心

摘要: 本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣壳蛋白VP60序列保守区设计了1对特异性引物,利用SYBR Green II荧光染料,在实时荧光定量PCR方法的基础上结合熔解曲线进行分析,经典RHDV和RHDV2熔解温度(Tm)分别为(86.3±0.1)℃和(85.1±0.1)℃,扩增产物的熔解曲线分析均只出现单特异峰。结果表明,本研究建立的方法能够快速地鉴别经典RHDV和RHDV2。

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