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非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株三重荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 郭振华 1 ; 邢广旭 1 ; 翁茂洋 1 ; 金前跃 1 ; 乔松林 1 ; 张改平 2 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院

2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词: 非洲猪瘟病毒;荧光定量PCR;B646L基因;MGF505-2R基因;CD2v基因

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2022 年 004 期

页码: 619-625

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 针对非洲猪瘟病毒B646L、MGF505-2R和CD2v基因分别设计了引物和探针,经过条件优化,建立了基于TaqMan探针技术的三重荧光定量PCR检测方法。结果显示,本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法与猪场常见病毒的核酸不发生交叉反应,具有良好的特异性;敏感性分析显示,针对B646L、MGF505-2R和CD2v基因的最低检测下限分别为6.5,8.0和14.0 copies/μL;并且该方法在10~1~10~7 copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,组间变异系数为0.05%~2.68%,组内变异系数为0.10%~1.17%,稳定性良好。进一步针对临床核酸样品的检测显示,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的荧光定量PCR鉴别检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。

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