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药理激活p38/MAPK体外抗传染性喉气管炎病毒效应的检测

文献类型： 中文期刊

作者： 崔露 1 ; 刘柘一 1 ; 张宇 1 ; 韩宗玺 1 ; 刘胜旺 1 ; 李海 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽呼吸道传染病创新团队

关键词： 传染性喉气管炎病毒;p38丝裂原活化蛋白激酶;转录谱;凋亡

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 007 期

页码： 723-730,746

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)是一种严重危害我国和世界养禽业的重要病原.本研究以ILTV-LJS09株感染的鸡LMH细胞系作为研究模型,对该病毒的全基因组转录谱分析,采用基因富集分析(GSEA)分析细胞中的信号通路.结果发现MAPK通路是ILTV感染LMH细胞后最显著激活的通路.进一步采用western blot鉴定,结果显示ILTV感染可以显著激活宿主细胞p38/MAPK信号通路.本研究同时采用脱氢紫堇碱(DHC)和佛波酯(PMA)作为p38/MAPK激活剂,采用特异性荧光定量PCR检测病毒基因组拷贝数,通过测定病毒的TCID50检测病毒滴度,利用荧光定量PCR检测细胞中代谢相关基因的转录水平,使用高内涵成像技术结合Annexin V-FITC/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,从而探究药理激活p38/MAPK对ILTV感染的影响.病毒特异性荧光定量PCR检测结果显示,DHC和PMA均显著降低ILTV基因组的复制(P<0.05).TCID50测定结果显示,DHC和PMA还显著抑制ILTV感染性病毒粒子的增殖(P<0.05).荧光定量PCR检测结果显示,无论DHC还是PMA对感染细胞代谢基因的总体转录水平均无明显影响.高内涵成像技术检测结果显示,DHC和PMA显著加剧ILTV感染细胞的凋亡(P<0.05).综上所述,本研究结果显示DHC和PMA均能够在不影响感染细胞代谢基因表达的情况下,通过加剧ILTV感染细胞的凋亡有效抑制ILTV的感染.本研究在ILTV体外感染模型中证明药理激活p38/MAPK信号通路具有高效的抗病毒作用,为治疗ILTV的感染提供了新的思路,对其他疱疹病毒感染的防治研究也具有借鉴意义.

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