文献类型： 中文期刊

作者： 李沛恒 ¹ ; 伊立超 ² ; 陈竞 ² ; 邹万成 ² ; 张国庆 ² ; 金宁一 ² ; 李昌 ² ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物医学院

2.中国农业科学院长春兽医研究所/中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元

关键词： 猪流行性腹泻病毒;受体结合区;小鼠血清;间接ELISA方法

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN：

年卷期： 2023 年 007 期

页码： 64-68

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立检测感染小鼠血清中猪流行性腹泻病毒（PEDV）抗体的方法，本研究应用PEDV受体结合区（receptor binding domain, RBD）重组蛋白作为抗原，通过探索各反应的最佳条件，并进行了该方法灵敏度、重复性、特异性分析。结果显示，最佳蛋白包被浓度为5μg/mL,待检血清稀释浓度为1∶400,孵育时间为37℃30 min,羊抗鼠IgG-HRP作为二抗，孵育条件为37℃30 min,底物显色时间为15 min。对建立的ELISA检测方法进行验证，阳性对照血清的稀释度为1∶204 800倍时OD₄₅₀值仍大于临界值，批内和批间的变异系数均小于10%,对猪传染性胃肠炎病毒和猪δ冠状病毒抗体小鼠阳性血清检测均不发生交叉反应。结果表明本研究建立的小鼠血清PEDV抗体间接ELISA方法具有很好的灵敏度、重复性、特异性。为PEDV候选疫苗的小鼠血清特异性抗体检测提供了一种精准、高效的方法。