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抗逆大豆IND-??41?-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化

文献类型: 中文期刊

作者: 肖芳 1 ; 李允静 1 ; 武玉花 1 ; 李俊 1 ; 高鸿飞 1 ; 翟杉杉 1 ; 吴刚 1 ; 梁晋刚 2 ;

作者机构: 1.中国农业科学院油料作物研究所/农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室/农业农村部植物生态环境安全监督检验测试中心(武汉)/农业农村部农业转基因生物溯源重点实验室

2.农业农村部科技发展中心

关键词: 转基因;抗逆大豆IND-??41?-5;转化体特异性;定性PCR

期刊名称: 中国油料作物学报

ISSN: 1007-9084

年卷期: 2024 年 46 卷 005 期

页码: 1148-1156

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 抗逆大豆IND-??41?-5已经批准获得我国进口用作加工原料的安全证书,含有外源HaHB4基因和bar标记基因。本研究根据抗逆大豆IND-??41?-5转化体5′端和3′端插入位点旁侧序列信息,设计19对引物,结合罗萨里奥农业生物技术学院公司的1对引物,针对20对引物组合利用定性PCR技术进行引物特异性筛选,结果显示5′端的14号引物特异性良好,优化后获得最佳反应体系和反应程序;经测试,该引物特异性好、稳定性高,检出限达0.1%,扩增片段大小248 bp。经8家有资质实验室对本方法的特异性、检出限、重复性和再现性进行验证,各项参数均达到国家标准要求。本研究成功建立了抗逆大豆IND-??41?-5转化体定性PCR检测方法,为IND-??41?-5转化体在国内的安全监管提供技术支撑。

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