文献类型： 中文期刊

作者： 王永刚 ¹ ; 杨光瑞 ² ; 马雪青 ² ; 王鸣刚 ² ; 冷非凡 ² ; 王帆 ² ; 马建忠 ² ; 陈吉祥 ³ ;

作者机构： 1.兰州理工大学生命科学与工程学院;兰州理工大学能源与动力工程学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;中国科学院青岛生物能源与过程研究所

2.;兰州理工大学生命科学与工程学院;兰州理工大学能源与动力工程学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;中国科学院青岛生物能源与过程研究所

3.;兰州理工大学生命科学与工程学院;兰州理工大学能源与动力工程学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;中国科学院青岛生物能源与过程研究所;

关键词： 大肠杆菌;白毛蛇;内生真菌;链格孢菌;抗菌机制;细胞膜通透性;细胞膜结构;DNA损伤

期刊名称： 中草药

ISSN： 0253-2670

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 374-381

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的研究分离自药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制。方法采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和蛋白质的变化;结合流式细胞仪、扫描电子显微镜、凝胶阻滞实验、圆二色谱和荧光实时定量PCR的分析方法研究了B06e对大肠杆菌细胞膜结构、形态、DNA的影响。结果 B06e对大肠杆菌的MIC为25μg/m L,3×MIC处理组的电导率是对照组的1.01倍;3×MIC处理组的β-半乳糖苷酶活性是对照组的11.6倍;流式细胞仪分析表明3×MIC处理组被碘化丙啶(PI)染色的阳性细胞比是对照组的286.5倍;扫描电子显微镜结果显示,B06e处理后菌体表面变得粗糙,细胞膜大量塌陷;以上结果说明B06e能增大细胞膜的通透性,破坏细胞膜的完整性。凝胶阻滞、圆二色谱的结果表明,B06e能够以嵌插的方式与DNA结合,但不能降解DNA;实时定量PCR结果表明,经B06e处理后rec A和rec N基因的表达量分别是对照组的2.9和3.7倍,说明B06e能破坏DNA的结构,迫使大肠杆菌启动了SOS修复。结论 B06e通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性和DNA的结构,使得细菌代谢紊乱,最终导致细菌丧失了生长繁殖的能力。