文献类型: 中文期刊
作者: 刘峰 1 ; 李坤 1 ; 章兴赜 1 ; 马雪青 1 ; 孙普 1 ; 李凤娟 1 ; 曹轶梅 1 ; 白兴文 1 ; 付元芳 1 ; 袁红 1 ; 欧阳一凡 1 ; 刘在新 1 ; 卢曾军 1 ; 李平花 1 ;
作者机构: 1.中国农业科学院兰州兽医研究所
关键词: 口蹄疫病毒;IgA抗体;构建表达;抗病毒活性
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2025 年 56 卷 008 期
页码: 3985-3991
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 口蹄疫是口蹄疫病毒引起危害猪、牛和羊等主要家畜的一种烈性传染病,为了发展抗口蹄疫病毒的新策略,进行疾病的综合防控,本研究将O型、A型口蹄疫病毒特异性猪BCR文库中筛选获得的5株O型和A型口蹄疫病毒共有克隆型IgA抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)序列分别与猪IgA的重链恒定区基因和轻链(Kappa链)恒定区基因拼接,分别构建5个IgA的重链载体质粒和5个轻链载体质粒,并将其分别共转染CHO-S悬浮细胞,转染7 d后收集上清进行蛋白纯化。纯化后的抗体用SDS-PAGE和Western blot鉴定、并用微量病毒中和试验分析5株IgA抗体中和O型、A型口蹄疫病毒的能力,用间接ELISA方法检测5株IgA抗体与口蹄疫病毒的反应性。结果表明:本研究成功构建质粒并表达了5株抗口蹄疫病毒的IgA抗体,这些抗体对O型和A型口蹄疫病毒均无中和活性,但其中1株抗体(POA-A8)与口蹄疫病毒特异性结合的能力最强,可以用于未来口蹄疫病毒诊断检测方法的建立。本研究为未来抗口蹄疫病毒非中和的分泌型IgA的研究以及病毒诊断方法的建立奠定了基础。
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