文献类型: 中文期刊
作者: 刘锋 1 ; 李坤 1 ; 马雪青 1 ; 欧阳一凡 1 ; 孙普 1 ; 章兴赜 1 ; 曹轶梅 1 ; 白兴文 1 ; 袁红 1 ; 李凤娟 1 ; 刘在新 1 ; 卢曾军 1 ; 李平花 1 ;
作者机构: 1.中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学 动物医学与生物安全学院
关键词: 口蹄疫病毒;分泌型IgA抗体;构建表达;特性研究
期刊名称: 微生物学报
ISSN: 0001-6209
年卷期: 2025 年 65 卷 009 期
页码: 3992-4000
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: [目的]制备抗口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)分泌型IgA(secretory IgA,sIgA)抗体,为口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)的综合防控提供新思路和前期基础.[方法]以实验室前期筛选的一株抗O型和A型FMDV的IgG型中和抗体POA-8 为模板,用猪IgA重链的恒定区基因(经密码子优化)替换IgG重链的相应区域,构建抗FMDV IgA抗体的重链真核表达质粒;同时分别构建含猪源J链和分泌片(secretory component,SC)的真核表达质粒,以及同时含IgA抗体的重链、轻链和J链基因的真核表达质粒.采用 4 质粒(重、轻、J和SC)或 2 质粒(重+轻+J和SC)分别瞬时共转染CHO-S悬浮细胞,进行抗FMDV sIgA抗体的组装表达.表达的sIgA抗体经纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定,并利用间接ELISA和微量病毒中和实验评价sIgA抗体与FMDV的结合活性和中和活性.[结果]4 质粒或 2 质粒共转染CHO-S细胞后均能成功组装表达抗FMDV的sIgA抗体,且sIgA抗体对O型和A型FMDV的结合能力及中和能力均强于 IgG 抗体.[结论]本研究成功构建了抗 FMDV sIgA 抗体的表达系统,为未来FMD黏膜疫苗和抗病毒药物的开发奠定了基础.
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