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烟草脆裂病毒介导的人参基因沉默体系的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李冉琪 1 ; 李雅淑 1 ; 汤淼淼 1 ; 曲正义 1 ; 郑培和 2 ; 侯微 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院特产研究所

2.吉林农业科技学院

关键词： 病毒诱导的基因沉默;人参;八氢番茄红素脱氢酶;烟草脆裂病毒;农杆菌

期刊名称： 中草药

ISSN： 0253-2670

年卷期： 2024 年 001 期

页码： 232-239

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的 人参Panax ginseng中构建烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus,TRV）介导的基因沉默体系，为人参中基因功能的验证提供新方法。方法 通过序列比对得到人参中八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase,PDS）基因的完整序列，利用保守结构域预测工具得到核心片段，将其整合进pTRV2载体内。重组载体转化农杆菌后侵染人参叶片，观察表型并利用q PCR检测沉默效率。结果 通过序列比对得到了2条PDS基因。PgPDS1基因c DNA序列全长1 746 bp，编码581个氨基酸；PgPDS2基因c DNA序列全长1299bp，编码432个氨基酸。2个PgPDS蛋白均具有典型的PDS结构域。将重组载体通过农杆菌转化人参叶片，接种3周后叶片表型无变化，5周后叶片尖端以及边缘出现枯萎现象。经q PCR检测，接种后3周和5周人参内源PgPDS基因表达量分别下降至接种前的70.37%和37.35%，表明体系构建成功。结论 人参中成功构建了TRV介导的基因沉默体系。

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