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鸡痘病毒复制非必需位点的筛选及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 张雪梅 1 ; 赵妍 1 ; 张晓彩 1 ; 王云峰 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病创新团队

关键词： 重组鸡痘病毒;插入位点;增强型绿色荧光蛋白

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2015 年 37 卷 06 期

页码： 422-425

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选新的高效的鸡痘病毒(FPV)中外源基因的插入位点,本研究选择FPV ORF161与ORF162之间的基因间隔区作为重组位点,构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的转移载体,以表达鸡传染性喉气管炎病毒g B基因的重组FPV(r FPV-g B)为亲本病毒,通过在鸡胚成纤维细胞(CEF)中同源重组,并经过蚀斑纯化筛选获得能够稳定表达gfp报告基因的重组病毒,命名为r FPV-g B161gfp。将r FPV-g B161gfp与亲本病毒连续传代20代,每5代进行荧光显微镜观察、PCR检测及复制动力学比较,结果表明重组病毒遗传稳定性良好,而且重组病毒与亲本病毒生长特性一致。本研究鉴定的新外源基因插入位点为构建多价重组FPV疫苗奠定了基础。

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