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表达胸腺肽和干扰素融合蛋白的重组乳酸乳球菌作为鸡新城疫病毒活疫苗免疫佐剂的初步研究

文献类型: 中文期刊

作者: 胡洪娇 1 ; 王贺 1 ; 刘增琪 1 ; 崔子扬 2 ; 胡馨匀 3 ; 崔红玉 3 ; 王云峰 4 ; 何高明 1 ;

作者机构: 1.石河子大学动物科技学院

2.河北北方大学临床医学院

3.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

4.哈尔滨国生生物科技股份有限公司

关键词: 滴鼻佐剂;胸腺肽;干扰素;重组乳酸乳球菌;免疫增强剂

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2024 年 46 卷 004 期

页码: 392-400

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为评估以滴鼻方式免疫表达鸡胸腺肽和鸡干扰素融合蛋白的重组乳酸乳球菌能否作为新城疫病毒(NDV)活疫苗的免疫佐剂及对其免疫效力的影响,本研究以表达鸡胸腺肽和鸡γ干扰素融合蛋白(cTα1-cIFN-γ,后简写为Tα1-IFN)的重组乳酸乳球菌(Tα1-IFN/r-L. lactis)与NDV活疫苗混合后(Tα1-IFN/r-L. lactis+NDV活疫苗)滴鼻免疫14日龄SPF鸡,同时设NDV活疫苗组、L. lactis+NDV活疫苗组及PBS阴性对照组。分别于免疫后不同时间(3 d、7 d、14 d、21 d、28 d)采血,于免疫后14 d、21 d、28 d分别检测各组鸡血清中的HI抗体效价;采用间接ELISA测定免疫后3 d、7 d及14 d各组鸡血清中主要细胞因子的分泌水平;分离各组鸡免疫后21 d及28 d外周血单个核细胞(PBMC)和外周血白细胞,分别通过CCK-8法检测各组鸡PBMC和白细胞中抗原递呈细胞(APC)的增殖活性。HI抗体检结果显示,分别在免疫后14 d、21 d,Tα1-IFN/r-L. lactis+NDV活疫苗组鸡的NDV HI抗体效价与NDV活疫苗组以及L. lactis+NDV活疫苗组均无显著差异;但免疫后28 d,该组鸡血清中的NDV HI抗体效价极显著高于其余两组(P<0.0001)。细胞因子检测结果显示,在免疫后各时间点Tα1-IFN/r-L. lactis+NDV活疫苗组鸡血清中IFN-γ及IL-2 (Th1型细胞因子)和IL-4 (Th2型细胞因子)的分泌水平基本均显著或者均极显著高于NDV活疫苗组、L. lactis+NDV活疫苗组及阴性对照组(14 d的IL4除外)。Tα1-IFN/r-L. lactis+NDV活疫苗组鸡血清中IL-1β (促炎因子)和IL-10 (抗炎因子)的分泌水平在免疫后3 d、7 d、14 d均极显著高于其余各组(P<0.0001)。细胞增殖活性的检测结果显示,免疫后21 d和28 d,Tα1-IFN/r-L. lactis+NDV活疫苗组鸡PBMC的增殖活性均极显著高于其余各组;免疫后28 d,该组鸡PBMC的增殖活性均极显著高于L. lactis+NDV活疫苗组和阴性对照组(P<0.0001),但与NDV活疫苗组差异不显著(P>0.05);免疫后21 d和28 d,Tα1-IFN/r-L. lactis+NDV活疫苗组鸡外周血白细胞中APC的增殖活性均极显著高于其余各组(P<0.0001);免疫后28 d,该组鸡白细胞中APC的增殖活性极显著高于NDV活疫苗组(P<0.01),但与L. lactis+NDV活疫苗组和阴性对照组均无显著差异。上述结果表明,本研究采用表达Tα1-IFN的重组乳酸乳球菌与NDV活疫苗同时滴鼻免疫SPF鸡后,可诱导其产生较高水平的体液免疫及细胞免疫反应,增强SPF鸡免疫系统的应答能力,同时又能维持鸡体内的免疫稳态。有望成为一种新型的、有潜力的免疫佐剂,为新型免疫佐剂的开发提供了重要实验数据及参考依据。

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