文献类型： 中文期刊

作者： 李俊 ¹ ; 单露英 ² ; 肖芳 ¹ ; 李允静 ¹ ; 高鸿飞 ¹ ; 翟杉杉 ¹ ; 吴刚 ¹ ; 张秀杰 ² ; 武玉花 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院油料作物研究所/农业农村部农业转基因生物溯源重点实验室

2.农业农村部科技发展中心

关键词： 转基因玉米MON87427;基体标准物质;二重微滴数字PCR;特性量值;不确定度

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2023 年 008 期

页码： 1444-1455

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】转基因检测标准物质是转基因生物安全监管、标识制度实施的物质基础，是实验室内检测数据溯源、实验室间检测数据可比的保证。中国于2017年批准进口转基因玉米MON87427用作加工原料，其安全监管和检测急需研制有证标准物质。【方法】以开发商提供的转基因玉米MON87427杂合种子和非转基因受体种子为原材料，对转基因玉米MON87427和其受体种子分别清洗、干燥、冷冻研磨、粒径及含水量检测，按质量分数（以干基计）称量配制得到质量分数分别为60.0、99.5和1 000.0 mg·g^-1的转基因玉米MON87427基体标准物质MON87427a、MON87427b和MON87427c。运用实时荧光定量PCR进行粉末的均匀性初检，初检合格后分装。用MON87427/zSSIIb二重微滴数字PCR（ddPCR）方法进行标准物质均匀性、稳定性评估和8家实验室联合定值。根据《标准物质定值的通用原则及统计学原理》（JJF 1343）进行标准物质均匀性评估、稳定性评估、联合定值数据的处理及不确定度评定。【结果】本批标准物质有MON87427a、MON87427b、MON87427c 3个浓度，粒径小于200μm的粉末大于80%，含水量低于5%。用棕色玻璃瓶分装，不低于1.0 g/瓶，充氮后轧盖，3个浓度的标准物质各分装400瓶。3种标准物质均匀性检验的F值均小于临界值F_{0.05（14,30）}（2.04），在瓶内和瓶间具有良好的均匀性，使用时，最小取样量为100 mg。标准物质在25℃、37℃和60℃条件下可稳定储存14 d，表明在常温下运输14 d标准物质特性量值不发生趋势性变化；在4℃和-20℃条件下长期稳定性达到12个月；开盖取样5次，标准物质特性量值未发生显著偏离。8家实验室联合测定的标准物质拷贝数比值无异常值、呈正态分布、且等精度，标准物质MON87427a、MON87427b、MON87427c的标准值及扩展不确定度分别为（2.92±0.44）%、（4.89±0.57）%、（52.1±3.4）%。【结论】研制的转基因玉米MON87427梯度含量基体标准物质均匀性良好，可稳定运输和储存，满足转基因玉米MON87427定性、定量检测需求，为转基因玉米MON87427的安全监管、定量标识制度的实施提供了可靠的有证标准物质。