科研产出
Pladienolide B对牛胚胎干细胞多能性相关基因表达及细胞活力的影响
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【背景】牛胚胎干细胞（bovine embryonic stem cells,BESCs）因具备较高的多能性，在牛品种保存、品种选育及研究家畜胚胎发育调控机制方面具有重要的应用价值。然而，BESCs多能性维持及分化调控的研究相对缺乏，很多机制仍不清楚。【目的】探究不同浓度Pladienolide B（PlaB）对BESCs多能标记基因、全能标记基因、胚胎细胞谱系基因表达及细胞活力的影响，为提高BESCs多能性提供参考和理论依据。【方法】利用免疫荧光检测牛BESCs多能标记基因的表达，利用实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR）检测不同浓度PlaB对BESCs剪接体、全能标记基因及胚胎细胞谱系基因表达的影响，利用RT-qPCR和Western Blot分别检测不同浓度PlaB对BESCs多能标记基因mRNA和蛋白表达的影响，利用CCK8和EDU染色检测不同浓度PlaB对BESCs增殖的影响。【结果】RT-qPCR结果显示，PlaB浓度为0.5—1.5 nmol·L-1时显著下调EPSCM-BESCs中SF3B1和SF3B2的mRNA表达水平；PlaB浓度为1.5nmol·L-1时，CTFR-BESCs中SF3B1和SF3B2的mRNA表达下降；PlaB浓度范围为0.5—1.5 nmol·L-1时，CTFR-BESCs和EPSCM-BESCs的SF3B4和SF3B5的mRNA表达水平呈剂量依赖性增加。此外，PlaB显著下调CTFR-BESCs中SF3B6的mRNA表达。PlaB浓度为0.5—1.5 nmol·L-1时，EPSCM-BESCs和CTFR-BESCs中剪接体LSM4的mRNA表达显著下调。PlaB浓度为0.5—1.5 nmol·L-1时，显著下调CTFR-BESCs的EFTUD2 mRNA表达水平；PlaB浓度为1—1.5 nmol·L-1时能显著下调BEPSCM-BESCs的EFTUD2 mRNA表达水平。浓度为0.5—1.5 nmol·L-1范围内，PlaB均以剂量依赖性上调CTFR-BESCs和EPSCM-BESCs中多能标记基因OCT4、SOX2及NANOG的mRNA表达水平和蛋白水平。在PlaB浓度为0.5—1.5 nmol·L-1范围内，PlaB以剂量依赖性上调CTFR-BESCs和EPSCM-BESCs中全能标记基因MDM2、PID1及BTG2的mRNA表达水平，而下调DDIT4和PDRG1的mRNA表达水平。CTFR-BESCs中添加PlaB均上调胚胎细胞谱系基因的表达，而EPSCM-BESCs中添加PlaB显著降低GATA4、GATA6、SOX7等胚胎细胞谱系基因的表达，但是对于ZIC1没有显著影响。随着PlaB剂量增加和处理时间延长，CTFR-BESCs和EPSCM-BESCs细胞活力均呈下降趋势，但CTFR-BESCs比EPSCM-BESCs更敏感。【结论】PlaB显著上调CTFR-BESCs和EPSCM-BESCs中多能标记基因和部分全能标记基因的表达；降低EPSCM-BESCs中胚胎细胞谱系基因的表达和细胞活力。PlaB对两种BESCs发挥作用的浓度及对基因表达的影响并不完全一致。由于PlaB降低BESCs的细胞活力，仍需要进一步研究以优化培养体系。
关键词： 牛胚胎干细胞 Pladienolide B 剪接体 多能性相关基因 细胞活力
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大豆低聚糖优异种质鉴定及GWAS分析
《植物遗传资源学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：大豆中含有丰富的营养物质和活性物质，其中低聚糖有许多对人体健康有益的功能，大范围的鉴定评价并筛选大豆低聚糖特异种质具有重要的育种意义。本研究利用高效液相色谱法（HPLC,high performance liquid chromatography），测量了包含264份大豆材料的自然群体的蔗糖含量、棉子糖含量、水苏糖含量以及总低聚糖含量。结果表明3种低聚糖中蔗糖占总低聚糖的比例最高，棉子糖占比最低，海南三亚和江苏南京两个环境下大豆的总低聚糖含量范围分别为6.18%～11.46%和4.19%～13.80%，共筛选出不同环境下表现稳定的10份大豆低聚糖特异种质。结合大豆自然群体的低聚糖含量表型数据和基因型数据进行了全基因组关联分析，在不同环境下分别鉴定到与低聚糖显著关联的SNPs，并挖掘目的性状候选基因。本研究为特用大豆品种选育提供了材料支撑，为发掘大豆低聚糖候选基因和开发分子标记提供了较好的基础。
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Bt Cry毒素抗虫模拟物靶向创新设计
《生物工程学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：Bt Cry毒素是当前研究最深入、应用最广的生物抗虫蛋白，对农业害虫的绿色防治发挥了重大作用。然而，随着其制剂和转基因抗虫作物的广泛应用，由此驱动诱发的靶标害虫抗药性及潜在生态安全风险等问题日益凸显。探寻具备模拟Bt Cry毒素杀虫功能的新型抗虫蛋白材料，不仅可为农作物持续健康生产保驾护航，也能在一定程度上缓解靶标害虫对Bt Cry毒素的抗药性压力。近年来，笔者团队以抗体“免疫网络学说（immune network theory）”中Ab2β类型抗独特型抗体（anti-idiotype antibody, Anti-Id）具备模拟抗原结构和功能的特性为理论依据，借助噬菌体展示抗体库及特异性抗体高通量筛选与鉴定技术，设计Bt Cry毒素抗体为包被靶点抗原，从噬菌体抗体库中靶向筛选到了一系列具备模拟Bt Cry毒素抗虫功能的Ab2β类型抗独特型抗体（即Bt Cry毒素抗虫模拟物），其中活性最强的Bt Cry毒素抗虫模拟物对靶标害虫的致死率接近相应原Bt Cry毒素的80%，初步实现了Bt Cry毒素抗虫模拟物的靶向设计。本文从理论依据、技术条件、研究现状等方面进行系统概述，并就相关技术发展趋势以及如何推进现有成果落地应用等展开深入探讨，旨在为绿色抗虫材料创新研发提供全新思路和实例参考。
关键词： Bt Cry毒素 抗独特型抗体 噬菌体展示抗体 抗虫蛋白 生物防治
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硅锌肥及其施用方式对南粳46产量和稻米品质的影响
《中国水稻科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]比较硅锌肥及其施用方式对南粳46稻米产量和品质的影响,为调优栽培提供参考依据.[方法]以优良食味粳稻品种南粳46为材料,倒4叶期土壤追施和孕穗期(抽穗前5~7 d)叶面喷施硅肥和锌肥,设置土壤追施硅肥(Si-B)、土壤追施锌肥(Zn-B)、土壤追施硅肥+叶面喷施硅肥(Si-B+Si-L)、土壤追施锌肥+叶面喷施锌肥(Zn-B+Zn-L)、土壤追施硅肥+土壤追施锌肥(Si-B+Zn-B)、叶面喷施硅肥(Si-L)、叶面喷施锌肥(Zn-L)、叶面喷施硅肥+叶面喷施锌肥(Si-L+Zn-L)8个处理,以不施硅锌肥(CK)为对照,调查分析不同处理对南粳46籽粒产量及其构成因素、加工品质、外观品质、食味品质和香味物质2-乙酰-1-吡咯啉(2-AP)含量的影响.[结果]施用硅锌肥对南粳46均有明显的增产作用,增幅为0.8%~11.9%,增产的原因主要是增加了每穗粒数和千粒重,而对穗数和结实率没有明显影响.施用硅肥使糙米率和精米率下降,施用锌肥则使糙米率和精米率增加,施用硅肥和锌肥都可使整精米率提高,施用锌肥提高整精米率的效果比施用硅肥更明显.硅锌肥对直链淀粉含量和RVA特征值的影响随处理不同而异,但施用硅锌肥可以提高崩解值,降低消减值,使胶稠度显著增加,食味值明显提高,稻米2-AP含量显著增加,香味明显变浓.[结论]倒4叶期土壤追施硅肥与孕穗期叶面喷施锌肥相结合,既可增加南粳46的产量,又能提高整精米率和食味品质,增加香味.
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杨梅酒酿造工艺优化及香气成分研究
《中国酿造 》 2023 北大核心
摘要：以杨梅为原料，酵母菌RV171为发酵菌种制备杨梅酒。以酒精度为评价指标，以酵母菌添加量、发酵温度、发酵时间为考察因素，通过单因素试验和响应面试验优化杨梅酒发酵工艺，并通过顶空固相微萃取（HS-SPME）结合气相色谱-质谱（GC-MS）联用分析杨梅汁和杨梅酒的挥发性香气成分。结果表明，杨梅酒最优发酵工艺条件为酵母添加量0.3%、发酵温度26℃、发酵时间9 d。在此条件下，制得的杨梅酒酒精度为12.63%vol。香气成分测定结果表明，杨梅酒中共检出挥发性香气成分35种，醛类、醇类、酯类是杨梅酒最主要的挥发性成分，且杨梅酒中醛类、醇类和萜烯类成分相对含量分别显著提高24.37%、14.86%、70.82%（P＜0.05），酯类显著降低51.04%（P＜0.05）。由此可知，发酵所得杨梅酒香气丰富，可以解决杨梅资源浪费问题，具有重要的生产指导意义。
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桑黄不同极性溶剂分步提取物功能成分与生物活性及相关性分析
《粮食与油脂 》 2023 北大核心
摘要：采用体积分数60%乙醇提取桑黄，依次用4种不同极性溶剂对乙醇粗提物分步萃取，分别减压浓缩后获得体积分数60%乙醇粗提物（SEP）、石油醚提取物（PP）、氯仿提取物（CP）、乙酸乙酯提取物（EP）、正丁醇提取物（NP）和水提取物（WP）,分析其主要功能成分及抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶能力。结果表明：EP中多酚和黄酮含量最高；WP中多糖和三萜类化合物含量较高；PP中4种功能成分均较低。EP对DPPH·和·OH的清除能力及还原力最好，对α-葡萄糖苷酶的抑制效果最强。相关性分析表明，抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶能力与其多糖、多酚和黄酮的含量关系密切。
关键词： 桑黄 功能成分 抗氧化能力 α-葡萄糖苷酶抑制能力 相关性分析
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二氢卟吩铁对花针期干旱及复水后花生叶片光合特性的影响
《花生学报 》 2023 北大核心
摘要：为阐明新型植物生长调节剂二氢卟吩铁（ICe6）影响花针期干旱及复水后花生光合特性的生理机制，于2021和2022年在江苏省农业科学院防雨旱棚内进行盆栽试验，研究干旱及复水后ICe6对花生光合特性及干物质积累与分配的影响。结果表明：干旱结束时，干旱胁迫显著降低了花生叶片的光合参数和RuBPCase活性，光合基因AhRuBP相对表达量下调、AhPORA上调，喷施ICe6显著提高干旱植株叶片的净光合速率（Pn）和蒸腾速率（Tr）,叶片AhPORA和AhLHCB3的基因相对表达量亦显著上调，叶片干物质分配比例增加，胁迫指数WSI降低。复水后第7天，干旱胁迫植株的光合参数迅速恢复，喷施ICe6的干旱植株的Tr、RuBPCase活性显著大于喷施清水植株，Tr两年增幅为11.7%和20.8%,RuBPCase活性增幅达14.9%和69.9%;AhRuBP基因相对表达量亦显著上调。复水后第20天，喷施ICe6的干旱植株叶绿素a（Chl a）含量、Pn、气孔导度（Gs）、Tr、RuBPCase活性仍显著高于喷施清水处理；喷施ICe6亦显著提升植株的生殖生长，荚果干物质量增加26.7%,荚果干物质分配比例增大15.6%。综上所述，ICe6可以显著提升干旱胁迫下花生叶片的光合性能，并促进复水后花生光合性能的快速恢复。
关键词： 花生 干旱胁迫 复水 二氢卟吩铁 光合特性 RuBPCase活性
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基于RFID与目标检测的种鹅个体产蛋信息监测方法
《江苏农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为解决群养种鹅个体产蛋信息监测难度大的问题，提出一种基于射频识别技术（radio frequency identification, RFID）与目标检测算法的种鹅个体产蛋信息监测方法。首先，使用134.2 kHz低频RFID实现无接触获取产蛋种鹅身份信息。其次，引入目标检测算法实时获取种鹅与鹅蛋的位置与数量信息，采用微调训练的方法分阶段训练目标检测模型，以增加模型在小数据集情况下的收敛速度与精度。利用种鹅定点产蛋的行为特点，将图像中每个独立产蛋区域提取为感兴趣区域，实现对每个产蛋区域的独立监测。最后，设计目标计数算法减小计数结果的误差，通过判断种鹅与鹅蛋的数量变化情况，获得种鹅个体开始产蛋时间、结束产蛋时间及产蛋结果。试验结果表明，YOLOv4目标检测模型检测种鹅与鹅蛋的平均精度均值（mAP）为93.59%,种鹅个体身份信息的监测准确率为98.5%,产蛋行为信息的监测准确率为91.3%,符合产蛋信息监测的要求。
关键词： 种鹅 产蛋监测 无线射频识别 目标检测 YOLOv4 目标计数
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SNP芯片评估柯尔克孜羊群体遗传多样性和遗传结构
《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：旨在了解柯尔克孜羊群体的遗传多样性和遗传结构，有效地保护和利用其遗传资源。本研究利用绵羊SNP 50K v3芯片检测61只柯尔克孜种羊（31只公羊、30只母羊）个体的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）;Plink（V1.90）软件对数据进行质控，计算群体有效含量、多态标记的比例、观测杂合度、期望杂合度、多态信息含量、有效等位基因数、最小等位基因频率，分析群体的遗传多样性；Plink计算连续性纯合片段（runs of homozygosity, ROH）和近交系数FROH;构建状态同源距离矩阵（identical by state, IBS）,并采用Gmatrix软件构建G矩阵，解析柯尔克孜羊群的遗传距离和亲缘关系；使用Mega X软件构建种公羊进化树，分析群体家系结构。结果显示，61只柯尔克孜羊共得到64 734个SNPs标记，通过质检的SNPs为56 763个；平均多态信息含量为0.273±0.112,平均观察杂合度和平均期望杂合度分别为0.368±0.140和0.368±0.130,平均最小等位基因频率为0.263±0.147。柯尔克孜羊群平均IBS遗传距离为0.294,G矩阵和IBS距离矩阵结果均表明柯尔克孜羊群个体间亲缘关系较远。61只柯尔克孜羊共检测到200个ROHs, 67.5%的ROHs长度在1～5 Mb之间，56只柯尔克孜羊ROH长度在0～50 Mb之间。基于ROH的平均近交系数为0.008 19±0.018 8,其中公羊平均近交系数为0.004 65±0.008,说明柯尔克孜羊群体的近交程度较低。进化树结果表明，柯尔克孜羊群目前有25个家系，大部分家系公羊数量太少。综上所述，SNP芯片评估柯尔克孜羊群体的遗传多样性和遗传结构，发现柯尔克孜羊群体遗传多样性较丰富，群体内近交程度低，虽然家系较多，但是每个家系种公羊数量太少，需要加强种公羊的后代选育，避免血统流失。
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花生油脂合成相关酰基转移酶基因的研究进展
《江苏农业科学 》 2023 北大核心
摘要：花生是重要的油料作物和经济作物，我国花生年产量居世界第一，居国内油料作物首位，其总产的50%以上均用于榨油。囿于国内粮油争地矛盾和不断增长的油脂消费需求等因素，提高油料作物含油量对保障我国食用油脂安全具有重要的战略意义。花生种子油脂的主要成分为三酰甘油（TAG）,其合成受到多个限速酶基因的协同调控，这些基因的时空表达特性、脂肪酸底物选择性和非生物胁迫响应等机制与油脂积累密切相关，最终影响油籽的产量和品质形成。植物油脂合成是涉及多个亚细胞区室、多条合成途径调控的复杂代谢网络，本文在总结植物油脂区室化合成步骤的基础上，对花生油脂的功能特性以及花生油脂合成途径中相关关键酰基转移酶的作用机制和研究现状进行归纳阐述，并提出存在的问题和建议，为花生油脂性状的精准鉴定和遗传育种提供参考。
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