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猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素影响研究

文献类型： 会议论文

第一作者： 冯书堂

作者： 冯书堂 1 ; 董晓 1 ; 刘立新 1 ; 牟玉莲 1 ; 况玲 1 ; 陈红平 1 ; 张莉 1 ; 张勇 1 ; 张青峰 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094

关键词： 嵌合体;囊胚;近交系猪;原始生殖嵴细胞

会议名称： 中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 155-160

摘要： 从五指山猪(WAZP)近交系第8～13代培育群中,先后选用21头5～10月龄青年母猪,分别于授精后25～30d采集胎儿106个,进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究.以DMEM+F10(1:1)为基础培养液,按添加或不添加生长因子,将培养液分为A、B、C3种,并以STO细胞作饲养层,在38℃、5.0％CO2和湿润的气相中进行培养建系.结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株,其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存.并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究.研究发现:不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响,不同培养液对EG细胞建系效果不同,STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一.EG细胞系的初步建立,为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能.

分类号： S828.3

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