文献类型： 中文期刊
作者： 谭小雨 1 ; 杨洋 1 ; 郭紫晶 1 ; 李彦敏 1 ; 张志东 1 ;
作者机构： 1.西南民族大学畜牧兽医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
关键词： 快速核酸提取试剂;羊口疮;羊痘;qPCR;RPA-LFD
期刊名称： 畜禽业
ISSN： 1008-0414
年卷期： 2023 年 34 卷 005 期
页码： 1-5,9
摘要： 目的 合理选择病毒快速核酸提取方法.方法 分别采用2 种商品化核酸快提取法——Cell-to-cDNA裂解液(A法)和基于磁珠核酸提取方法(InnuPREP MP Basic Kit A,B法),提取羊临床样品中的羊口疮病毒(ORFV)和羊痘病毒(CaPV)核酸,使用实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)和重组酶聚合酶扩增结合侧流层析技术(RPA-LFD)方法进行平行检测,并与常规核酸提取方法(宝生物病毒DNA/RNA提取试剂盒,C法)比较.结果 与C法相比,在A法和B法提取的46 份疑似orf拭子中,qPCR的ORFV核酸检出率分别为70.8%和87.5%,RPA-LFD的检出率分别为69.5%和82.6%;在A法和B法提取的52 份疑似CaP的拭子样品中,qPCR的CaPV核酸检出率分别为77%和90%,RPA-LFD的检出率分别为65.5%和89.7%.对组织样品分析发现:A法不能用于组织样品的核酸提取;在B法提取的52 份疑似orf组织样品核酸中,与C法相比,qPCR的ORFV核酸检出率为93.7%,RPA-LFD的检出率93.3%;对B法提取的61 份疑似CaP组织样品核酸中,qPCR的CaPV核酸检出率为94.5%,RPA-LFD的检出率为88.7%.结论 磁珠核酸提取方法(B法)可适用于不同样品中的ORFV和CaPV核酸的快速提取.
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