文献类型： 中文期刊

作者： 姜人月 ¹ ; 庄忻雨 ² ; 田明尧 ² ; 唐家凤 ² ; 狄亚心 ² ; 杨松惠 ² ; 许智强 ¹ ; 于潼 ² ; 张桐 ² ; 金鑫 ¹ ; 金宁一 ² ;

作者机构： 1.延边大学农学院

2.中国农业科学院长春兽医研究所

关键词： 呼吸道合胞病毒;mRNA疫苗;密码子优化;体液免疫

期刊名称： 中国病原生物学杂志

ISSN： 1673-5234

年卷期： 2024 年 005 期

页码： 497-501

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的 制备呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前构象（pre-F）mRNA疫苗，进行可行性验证。方法 对抗原基因进行密码子优化设计，分别连接至pGEM-3Zf-N3载体上，通过质粒线性化、体外转录、纯化和Cap1加帽处理，得到功能性mRNAs。在转染至293T细胞后，利用Western blot和间接免疫荧光试（IFA）来确定目标蛋白的表达情况。通过微流控装置制备LNP/mRNAs疫苗免疫C57BL/6小鼠，检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体效价，评估免疫效果。结果 成功构建重组质粒Pre-F-GCN4t和mDS-Cav1,通过双酶切验证条带符合预期大小。表达目的抗原大小为57.57 ku和64.35 ku。成功检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体，Pre-F-GCN4t免疫组的效果优于mDS-Cav1组，3次免疫较2次免疫提升了2倍，抗体效价最高可达1∶4×10~4。结论 两种抗原设计模式均具有可行性，Pre-F-GCN4t的设计方式对于激活机体的体液免疫应答更有优势，mRNA疫苗无需体内转录，为呼吸道合胞病毒mRNA疫苗的优化设计提供理论基础。