文献类型： 中文期刊

作者： 惠丽丽 ¹ ; 岳慧贤 ¹ ; 蒋依倩 ¹ ; 张艳艳 ¹ ; 齐宇 ¹ ; 李思齐 ¹ ; 付林 ¹ ; 李其炫 ¹ ; 扈荣良 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院长春兽医研究所

关键词： 非洲猪瘟病毒;重组腺病毒;抗原鉴定;病毒复制;抑制性抗体

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2024 年 021 期

页码： 100-106,128

收录情况： 北大核心

摘要： 为了构建非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）抗原重组腺病毒并探讨不同抗原的免疫原性，试验以ASFV基因Ⅱ型SY18株基因组为模板，采用无缝连接技术构建13种带有His标签的ASFV抗原重组腺病毒，通过间接免疫荧光技术鉴定重组腺病毒在HEK-239AD细胞中的表达情况，并用构建的13种重组腺病毒与前期构建的25种重组腺病毒分别于试验第0,14,28天免疫小鼠，200μL/只(重组腺病毒稀释至1×10⁸ TCID₅₀/mL)。第3次免疫后第7天，通过摘眼球方法采集血液，制备血清，利用血清中和试验筛选出5种效果较好的可刺激动物机体产生ASFV抑制性抗体的抗原，并将这5种重组腺病毒混合后免疫猪只，每种重组腺病毒(稀释至1×10⁸ TCID₅₀/mL)用量为0.5 mL/头；首免（第0天）后第14天进行二免，二免后第14天口服ASFV基因Ⅱ型SY18株(效价为1×10⁴ TCID₅₀/mL) 200μL攻毒，探究重组腺病毒免疫保护效果。结果表明：本次试验构建的13种重组腺病毒均能在HEK-239AD细胞中稳定表达；从免疫小鼠血清中和试验筛选出5种抑制ASFV效果较好的重组腺病毒为rAdCMV-D129L、rAdCMV-EP84R、rAdCMV-E146L、rAdCMV-NP419L、rAdCMV-S273R。5头免疫重组腺病毒的猪均在攻毒后延迟发病，其中4头猪最终死亡，1头存活，保护率为20%,免疫PBS的猪只在攻毒后发病快，并全部死亡。说明ASFV抗原重组腺病毒可以刺激机体产生免疫反应，但用经过血清中和试验筛选出来的5种抗原制备的重组腺病毒无法提供完全保护。