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非洲猪瘟病毒p54间接ELISA抗体检测方法的建立及试剂盒研制

文献类型: 中文期刊

作者: 岳慧贤 1 ; 李其炫 1 ; 惠丽丽 1 ; 赵心馨 1 ; 陈腾 1 ; 张艳艳 1 ; 王述超 1 ; 缪发明 1 ; 张菲 1 ; 张守峰 1 ; 扈荣良 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院长春兽医研究所

关键词: 非洲猪瘟病毒;p54蛋白;间接ELISA;试剂盒

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2024 年 005 期

页码: 907-913

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 非洲猪瘟是对全球养猪业危害最严重的病毒性传染病,目前尚无有效疫苗。p54蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的重要结构蛋白之一,参与病毒的吸附和侵入,是非洲猪瘟血清学诊断的重要靶标之一。本研究采用无标签的重组p54蛋白作为包被抗原,建立了ASFV p54间接ELISA抗体检测方法,优化了检测条件,组装成了试剂盒。根据对374份阴性猪血清的检测,确定了本试剂盒检测的临界值,并利用不同猪病原阳性质控血清进行了敏感性、特异性和稳定性研究。结果显示,本方法检测阴/阳性血清的临界值为0.250;敏感性血清质控品的最小检出限为1∶1 600倍,与ASFV阳性血清、猪伪狂犬病病毒阳性血清、猪繁殖与呼吸病毒综合征病毒阳性血清、猪圆环病毒2型阳性血清、猪细小病毒阳性血清和猪抗大肠杆菌阳性血清等6种特异性质控血清均无交叉反应;试制的3批试剂盒批间和批内变异系数均小于10%。试剂盒在2~8℃贮存9个月,特异性、敏感性保持不变。以上试验结果表明,本试剂盒具有良好的敏感性、特异性和稳定性,与OIE推荐的p72阻断ELISA抗体检测试剂盒具有较高符合率,为非洲猪瘟临床血清学诊断和抗体监测提供了良好的技术支持。

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