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鹅源class I类NDV生物学特性的研究及荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李长宇 1 ; 孙军峰 2 ; 赵冉 2 ; 王芳芳 2 ; 韩宗玺 2 ; 刘胜旺 2 ;

作者机构： 1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/禽呼吸道传染病创新团队

关键词： 新城疫病毒;鹅;分子特征;抗原性;热稳定性;荧光定量RT-PCR方法

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 009 期

页码： 923-930

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了解鹅源class I类新城疫病毒（NDV）的生物学特性，本研究以2022年在安徽活禽市场的鹅中分离到的AH713/22株为研究对象，测定其全基因组序列，分析其基因组分子特征和遗传进化特性；将AH713/22株感染鸡胚，接种1日龄雏鸡脑内，分析其致病性；利用制备的单因子血清进行交叉血凝抑制试验，分析其抗原性；将AH713/22株56℃水浴不同时间后检测HA效价，分析其耐热特性。结果显示，AH713/22株基因组长15 198 bp，具有典型的class I类NDV的基因组结构和分子特征，属于基因1.1.2亚型。F蛋白裂解位点为ERQERL,HN蛋白长度不同于已往报道的病毒株，含有618个氨基酸；鸡胚平均死亡时间（MDT）为134 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）为0.32，表明AH713/22属于弱毒株；抗原性检测结果显示AH713/22株与class II类基因II型NDV以及class I类代表性NDV之间存在不同程度的抗原性差异；耐热性试验显示AH713/22株在56℃热处理60 min后HA效价仍无显著变化，表明AH713/22株具有优良的热稳定性。进一步基于class I类基因1.1.2亚型NDV F基因的序列比对分析，针对其保守区域设计引物和探针，建立了荧光定量RT-PCR检测方法，结果显示该方法对质粒标准品的检测限为10～2拷贝数/μL，且能够特异性的检测class I类1.1.2亚型NDV，与其他常见的禽呼吸道病原核酸均无交叉反应。该方法用于临床样品检测结果与常规PCR检测结果一致。本研究系统鉴定了一株鹅源class I类NDV的遗传和分子生物学特性，加深了对我国class I类NDV遗传演化的认知，并建立了适用于我国优势基因型（1.1.2亚型）NDV的检测方法，为class I类NDV的监测和流行病学调查提供了技术支撑。

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[5]鹅源Ⅰ型禽副粘病毒JG97株F基因的分子特性分析. 刘梅,李文良,戴亚斌,冯太兰,王海丽,周新民. 2008

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[15]耐高温植酸酶的热稳定性评估方法分析. 王海燕,汤海鸥,王晓睿,杨禄良,刘影. 2013

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