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针对非洲猪瘟病毒K205R基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 乔思娜 1 ; 李丽薇 2 ; 赵款 3 ; 高飞 2 ; 周艳君 2 ; 姜一峰 2 ; 童武 2 ; 赵冉 4 ; 童光志 2 ; 李国新 2 ; 董世山 3 ;

作者机构: 1.河北农业大学动物医学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

3.河北农业大学

4.厦门市动物疫病预防控制中心

关键词: 非洲猪瘟病毒(ASFV);K205R基因;荧光定量PCR;检测方法

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2024 年 004 期

页码: 67-72

摘要: 为了快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swin fever virus,ASFV),本文根据我国流行毒株ASFV SY18(GenBank ID:MH766894.1)已公布的K205R基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对K205R基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法。经过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验分析显示,本文建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品在1×1011~1×10~2 copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-2.797,检测下限为10~2 copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.53774%,重复性好。本方法适用于临床样品及本实验室构建的表达ASFV K205R基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对ASFV快速检测及ASF早期诊断有重要意义。

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