文献类型： 中文期刊

作者： 帅文娜 ¹ ; 郭子强 ² ; 李佳乐 ² ; 罗梦 ² ; 李丽薇 ² ; 周艳君 ² ; 姜一峰 ² ; 童武 ² ; 童光志 ² ; 李兆龙 ² ; 高飞 ² ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所

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关键词： 猪细小病毒;NS1蛋白;多克隆抗体;原核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 003 期

页码： 314-320

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在制备PPV-NS1的多克隆抗体，并用猪细小病毒（PPV）和真核质粒pcDNA3.1(+)-NS1-3×Flag进行双重验证。首先将PPV的非结构蛋白编码基因NS1克隆至原核表达载体pETDuet，构建原核质粒pET-PPV-NS1。接着，将原核质粒pET-PPV-NS1转化至感受态E.coli BL21细胞中，经由1 mmol/LIPTG诱导以后，通过SDS-PAGE和Western-blot对NS1表达进行检测，结果表明，NS1基因在感受态细胞中得到了良好的表达。其次，将纯化后获得的NS1蛋白采用多点注射的方式对大白兔进行免疫，制备获得针对重组NS1蛋白的多克隆抗体。然后，将真核质粒pcDNA3.1(+)-NS1-3×Flag转染HEK 293T细胞；同时PPV感染ST细胞后收取蛋白样品，用上述制备的NS1多克隆抗体进行验证。结果显示，制备的NS1多克隆抗体具有良好的反应性和特异性。