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非洲猪瘟病毒F334L基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

文献类型: 中文期刊

作者: 刘佳晨 1 ; 李丽薇 1 ; 郭子强 1 ; 陈金霞 1 ; 曹云雷 1 ; 乔思娜 1 ; 刘长龙 1 ; 赵冉 2 ; 童光志 1 ; 高飞 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院上海兽医研究所

2.厦门市动物疫病预防控制中心

关键词: 非洲猪瘟病毒;病毒活载体;F334L基因;重组病毒

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2024 年 004 期

页码: 173-178

摘要: 本研究通过将非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的一种非结构蛋白编码基因F334L克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ,完成重组表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-F334L的构建。将pCold-Ⅰ-ASFV-F334L转化受体菌感受态细胞,经1 mmol/L的IPTG诱导原核表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,F334L基因得到了良好的表达,将所得的F334L基因编码蛋白纯化后免疫小鼠,获得含多克隆抗体的血清。利用该抗体检测实验室构建并拯救的表达ASFV F334L基因编码蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒rPRRSV-F334L,试验结果显示该多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性,证明了ASFV F334L基因可在PRRSV活载体中稳定表达,为ASFV活载体疫苗的研发提供了材料。

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