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犬冠状病毒与犬细小病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 傅宇飞 1 ; 李传峰 2 ; 田传龙 3 ; 李泽贤 4 ; 麦嘉迅 4 ; 程松 5 ; 刘禹含 2 ; 孟春春 2 ; 朱杰 2 ; 程国锋 1 ; 刘光清 2 ;

作者机构: 1.江苏科技大学生物技术学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

3.上海牧爱宠物用品有限公司

4.广州市海珠区立德动物医院

5.德国纳博科临动物临床中国检验实验室

关键词: 犬冠状病毒;犬细小病毒;双重荧光定量PCR;鉴别诊断

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2025 年 33 卷 003 期

页码: 75-83

摘要: 根据GenBank中犬冠状病毒(CCoV)和犬细小病毒(CPV)已有基因序列设计其对应引物,通过对反应体系和扩增程序的优化,建立了CCoV和CPV双重荧光定量PCR检测方法,评估了其敏感性、特异性和重复性。结果显示,该方法最佳退火温度为60 ℃,引物浓度分别为CCoV 1.0 μmol/L和CPV 0.1 μmol/L,检测下限均为10~2 copies/μL。批内与批间的变异系数均小于2%。该方法用于检测犬腺病毒(CAV)、犬圆环病毒(CaCV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬流感病毒(CIV)、犬副流感病毒(CPIV)均无特异性扩增。对68份临床样品的检测,结果表明CCoV阳性率为22.0%,CPV阳性率为61.8%,与普通PCR检测结果相比,本研究建立的方法更加灵敏。本研究建立的CCoV和CPV检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,可用于对CCoV和CPV的鉴别诊断。

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