文献类型： 中文期刊

作者： 尹茉莉 ¹ ; 张爽 ² ; 王振军 ³ ; 冯二凯 ⁴ ; 冷雪 ⁵ ; 王会岩; 李艳; 孙美艳;

作者机构： 1.吉林医药学院抗体工程科技协同创新中心

2.吉林市园林管理中心

3.中国农业科学院特产研究所

4.吉林农业大学

5.吉林医药学院检验学院

关键词： Marc-145细胞;生物反应器;微载体;胰蛋白酶;放大技术;猪繁殖与呼吸综合征病毒

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2019 年 13 期

页码： 11-15,20

摘要： 为了建立Marc-145细胞微载体培养放大技术,使其用于猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)疫苗的规模化生产,试验在7 L生物反应器内微载体培养Marc-145种子细胞,再用胰蛋白酶消化,然后进行逐级放大培养,并通过细胞最佳消化状态试验、保留胰蛋白酶消化液的影响试验、测试回收微载体试验等方法摸索胰蛋白酶消化放大技术参数.结果表明:Marc-145细胞在初级生物反应器内培养时,微载体使用量为5 g/L,细胞密度达3.18*10~6个/mL,并且在状态饱满时进行消化放大;在14 L生物反应器内培养时,Marc-145细胞均匀分布在微载体上并且代谢旺盛,在细胞密度为2.91*10~6个/mL时进行14 L消化放大;在14 L生物反应器内培养Marc-145细胞时,采用批培养方式,细胞比生长速率最大达0.031/h,在培养96小时时细胞密度达2.37*10~6个/mL.说明试验成功建立了生物反应器微载体培养Marc-145细胞的胰蛋白酶消化放大技术,并实现了逐级放大.