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猪伪狂犬病毒间接ELISA抗体检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 刘旻翾 1 ; 丁光明 2 ; 付钰广; 刘爱红; 陈佳宁; 李宝玉; 曾巧英; 刘光亮;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词： 猪伪狂犬病毒;肽段;间接ELISA

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 5 期

页码： 484-488

摘要： 为了满足我国现阶段猪伪狂犬病病毒(PRV)高频突变引发新疫情诊断的需求,本实验通过生物信息学分析比较,设计合成了针对PRV g B糖蛋白高度保守的抗原优势表位区肽段,命名为g B872.以此肽段为包被抗原,经条件优化建立了新型的PRV-g B间接ELISA抗体检测方法.该ELISA方法检测结果显示,其仅对PRV血清检测为阳性,而与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒(O型)、猪细小病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无交叉反应,表明该方法具有较强的特异性;最低检测下限血清稀释度为1∶128,高于IDEXX PRV/ADV g B抗体检测试剂盒检测下限稀释度(1∶4),表明该方法敏感性高;批内、批间重复性试验结果显示,变异系数均低于10%,重复性良好.利用该方法与Bio Chek PRV-g B抗体检测试剂盒检测90份临床血清样品,对比结果分析显示,两者阳性符合率为100%,阴性符合率为97.67%,总体符合率为97.78%;同时,采用该方法与IDEXX-g I(gE)和IDEXX-g B试剂盒分别对野毒感染血清和疫苗免疫血清同时检测,该方法可以准确识别野毒阳性血清和疫苗免疫阳性血清,与IDEXX两种试剂盒的结果一致.本研究建立的间接ELISA检测方法对PRV疫苗免疫效果评价、流行病学调查及防控提供了可靠的方法.

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